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發(fā)布時(shí)間：2021-03-29 23:09 人氣： 來(lái)源：http://www.aozoc.com
,式中：X1――細(xì)菌菌落數(shù)量，cfu/g或cfu/mL；, A
――5塊瓊脂培養(yǎng)液版本上的細(xì)菌菌落數(shù)量；, K
――稀釋液度。,當(dāng)菌體數(shù)在100之內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，超過(guò)100時(shí)才有二位有效數(shù)字。,假如試品菌落總數(shù)超出本規(guī)范的要求，按B2.3開(kāi)展復(fù)查和結(jié)果報(bào)告。,B2.3
復(fù)查方式,將存留的復(fù)查試品依前法進(jìn)行復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果均值都做到本規(guī)范的要求，則判斷被檢試品達(dá)標(biāo)；在其中有一切1次結(jié)果均值超出本標(biāo)準(zhǔn)，則判斷被檢試品不過(guò)關(guān)。,B3
大腸桿菌檢驗(yàn)方式,B3.1
操作流程,抽樣液5mL，打疫苗五十米L乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時(shí)，如不產(chǎn)酸都不脹氣，則報(bào)告為大腸桿菌呈陰性。,如產(chǎn)酸脹氣，則畫(huà)線(xiàn)打疫苗伊紅美藍(lán)瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時(shí)，觀(guān)查平板電腦上菌體形狀。典型性的沙門(mén)氏菌落為紫黑色或紅紫色，環(huán)形，邊沿齊整，表層光潔潮濕，常具備金屬質(zhì)感，也是有的呈紫黑，沒(méi)有或有點(diǎn)金屬質(zhì)感，或淡粉色，管理中心較深的菌體。,取疑是菌體1-2個(gè)作革蘭氏染色鏡檢查，另外打疫苗乳清蛋白發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時(shí)，觀(guān)查脹氣狀況。,B3.2
結(jié)果報(bào)告,凡乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳清蛋白發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍(lán)平板電腦上面有典型性沙門(mén)氏菌落，革蘭氏染色為呈陰性無(wú)枯草芽孢菌，可報(bào)告被檢試品驗(yàn)出大腸埃希菌。,B4
綠膿桿菌檢驗(yàn)方式,B4.1
操作流程,抽樣液5mL，添加到五十米L SCDLP細(xì)胞培養(yǎng)液中，充足攪拌，置35℃±2℃塑造18-24小時(shí)。若有綠膿桿菌生長(zhǎng)發(fā)育，細(xì)胞培養(yǎng)液表層展現(xiàn)一層薄菌膜，細(xì)胞培養(yǎng)液常呈淺綠色或深藍(lán)色。從細(xì)胞培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取塑造物，畫(huà)線(xiàn)打疫苗十六烷三羥基溴化銨瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時(shí)，觀(guān)查菌體特點(diǎn)。綠膿桿菌在這里培養(yǎng)液上生長(zhǎng)發(fā)育優(yōu)良，菌體平扁，邊沿不齊，菌體周邊培養(yǎng)液有點(diǎn)淡粉色，別的菌不久。,取異常菌體玻片作革蘭氏染色，鏡檢查為革蘭氏陽(yáng)性菌陰性菌者應(yīng)開(kāi)展以下實(shí)驗(yàn)。,抗霉素實(shí)驗(yàn)：取一小塊清潔的乳白色過(guò)濾紙片放到殺菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌檢測(cè)玻棒挑取異常菌體涂在過(guò)濾紙上面，隨后在其上滴入一滴新配置的1%二甲基對(duì)苯二胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，30s內(nèi)發(fā)生淡粉色或暗紫色，為抗霉素實(shí)驗(yàn)呈陽(yáng)性，不掉色者為呈陰性。,綠膿菌素實(shí)驗(yàn)：取2-3個(gè)異常菌體，各自打疫苗在綠膿菌素測(cè)量用培養(yǎng)液斜坡，35℃±2℃塑造24小時(shí)，添加三氯甲烷3-5mL，充足振蕩使塑造物中很有可能存有的綠膿菌素融解，待三氯甲烷呈深藍(lán)色時(shí)，用塑料吸管移到另一試管嬰兒中并添加1mol/L的硫酸1米L，振蕩后靜放一會(huì)兒。如頂層發(fā)生淡粉色或暗紫色即是呈陽(yáng)性，表明有綠膿菌素存有。,（規(guī)范的附則）,商品除菌性能、抗菌性能與穩(wěn)定性測(cè)試方式,C1
試品收集,為使試品具備優(yōu)良的象征性，應(yīng)當(dāng)同一批號(hào)三個(gè)運(yùn)送包裝中最少隨機(jī)抽取20件最少市場(chǎng)銷(xiāo)售包裝試品，在其中5件備用，5件做抗菌或除菌性能檢測(cè)，10件做穩(wěn)定性測(cè)試。,C2
實(shí)驗(yàn)菌與菌液制取,C2.1
實(shí)驗(yàn)菌,C2.1.1
病菌：橙黃色鏈球菌（ATCC 6538），大腸埃希菌（8099或ATCC 25922）。,C2.1.2
酵母：白色念珠菌（ATCC 10231）,菌液制?。喝【N第3-14代的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液斜坡新鮮塑造物（18-24小時(shí)），用5mL 0.03mol/L聚磷酸鹽緩沖溶液（一下通稱(chēng)PBS）洗下菌苔，使菌飄浮勻稱(chēng)后用以上PBS稀釋液至所需濃度值。,C3
除菌性能實(shí)驗(yàn)方式,該實(shí)驗(yàn)抽樣位置，依據(jù)被試商品經(jīng)營(yíng)者的表明而明確。,C3.1
還原劑評(píng)定實(shí)驗(yàn),開(kāi)展除菌性能檢測(cè)務(wù)必根據(jù)下列還原劑評(píng)定實(shí)驗(yàn)。,C3.1.1
實(shí)驗(yàn)排序, 1
）染菌樣照 5mL PBS,2
）染菌樣照 5mL 還原劑,3
）染菌對(duì)相片 5mL 還原劑,4
）樣照 5mL 還原劑 染菌對(duì)相片,5
）染菌對(duì)照片 5mL PBS,6
）同批號(hào)PBS,7
）同批號(hào)中和劑,8
）同批號(hào)培養(yǎng)基,C3.1.2
點(diǎn)評(píng)要求,1
）第1組無(wú)實(shí)驗(yàn)菌，或僅有極個(gè)別實(shí)驗(yàn)菌菌體生長(zhǎng)發(fā)育。,2
）第2組是較第1組為多，但較第3、4、5組為少的實(shí)驗(yàn)菌體生長(zhǎng)發(fā)育，并符合規(guī)定。,3
）第3、4、5組是類(lèi)似量實(shí)驗(yàn)菌生長(zhǎng)發(fā)育，并在1*104-9*104cfu/片中間，其小組之間菌體數(shù)誤差應(yīng)不超過(guò)15%。,4
）第6-8組無(wú)菌檢測(cè)生長(zhǎng)發(fā)育。,5
）持續(xù)3次實(shí)驗(yàn)獲得達(dá)標(biāo)點(diǎn)評(píng)。,C3.2
除菌實(shí)驗(yàn),C3.2.1
操作流程,將實(shí)驗(yàn)菌24小時(shí)斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對(duì)仍舊上面，收購(gòu) 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片）。,取被試件片（2.0cm*3.0cm）和對(duì)仍舊片（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒(méi)有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片，分為4組放置4個(gè)殺菌平皿內(nèi)。,取以上菌懸液，各自在每一個(gè)被試件片和對(duì)仍舊上面滴入100uL，勻稱(chēng)施膠，逐漸記時(shí)，功效2、5、10、20min，用無(wú)菌檢測(cè)鑷各自將樣照資金投入含5mL相對(duì)中和劑的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個(gè)稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個(gè)平皿，用涼至40-45℃的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母菌）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱(chēng)，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母菌），干活兒菌菌落計(jì)數(shù)。,實(shí)驗(yàn)反復(fù)3次，按式（C1）測(cè)算除菌率：, X3 =
（A-B）/A *100% （C1),式中：X3――除菌率，%；, A
――對(duì)比試品均值菌體數(shù)；, B
――被使試品均值菌體數(shù)。,C3.2.2
點(diǎn)評(píng)規(guī)范,除菌率≥90%，商品有抑菌作用。,C4
總混性抗（抑）菌商品抗菌特性實(shí)驗(yàn)方式,C4.1
操作流程,將實(shí)驗(yàn)菌24小時(shí)斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對(duì)仍舊上面或5mL樣液內(nèi)，收購(gòu) 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片或mL）。,取被試件片（2.0cm*3.0cm）或樣液（5mL）和對(duì)仍舊片或樣液（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒(méi)有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片（放置殺菌平皿內(nèi)）或4管。,取以上菌懸液，各自在每一個(gè)被試件片或樣液和對(duì)仍舊片或樣液上或內(nèi)滴加100uL，勻稱(chēng)施膠/混和，逐漸記時(shí)，功效2、5、10、20min，用無(wú)菌檢測(cè)鑷各自將樣照或樣液（0.5mL）資金投入含5mL PBS的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個(gè)稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個(gè)平皿，用涼至40-45℃的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母菌）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱(chēng)，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母菌），干活兒菌菌落計(jì)數(shù)。,實(shí)驗(yàn)反復(fù)3次，按式（C2）測(cè)算抗菌率 , X4 = ( A-B ) / A * 100
（C2),式中：X4――抗菌率，%；, A
――對(duì)比試品均值菌體數(shù)；, B
――被試試品均值菌體數(shù)。,C4.2
點(diǎn)評(píng)規(guī)范,抗菌率≥50%-90%，商品有殺菌作用，抗菌率≥90%，商品有較強(qiáng)殺菌作用。,C5
非溶出性抗（抑）菌商品抗菌特性實(shí)驗(yàn)方式,C5.1
操作流程,稱(chēng)量被試件片（裁成1.0cm*1.0cm尺寸）0.75g散裝包好。,將0.75g重樣照放進(jìn)一個(gè)250ML的三角燒瓶中，各自添加70mL PBS和5mL菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度值為1*104-9*104cfu/ mL。,將三角燒瓶固定不動(dòng)于震蕩搖床邊，以300r/min振搖1h。,取0.5mL振搖后的樣液，或用PBS做適度稀釋液后的樣液，以瓊脂竭盡法打疫苗平皿，開(kāi)展菌落計(jì)數(shù)。,另外設(shè)對(duì)仍舊片組和不用樣照組，對(duì)仍舊片組的對(duì)仍舊片與被試件片一樣尺寸但沒(méi)有抑菌成份，別的操作流程均與被試件片組同樣，不用樣照組各自取5mL菌懸液和70mL PBS添加一個(gè)250ML三角燒瓶中，攪拌，各自于0時(shí)間和震蕩1h后，各取0.5mL菌懸液與PBS的混合液做適度稀釋液，隨后開(kāi)展菌落計(jì)數(shù)。,實(shí)驗(yàn)反復(fù)3次，按式（C3）測(cè)算抗菌率：, X5 =
（A ? B）/A * 100% (C3),式中： X5――抗菌率，%；, A
――被試試品震蕩前均值菌體數(shù)；, B
――被試試品震蕩后均值菌體數(shù)。,C5.2
點(diǎn)評(píng)規(guī)范,不用樣照組的菌體數(shù)在1*104-9*104cfu/ mL中間，且試品震蕩前后左右均值菌體數(shù)誤差在10%之內(nèi)，實(shí)驗(yàn)合理；被試件片組抗菌率與對(duì)仍舊片組抗菌率的誤差＞26%，商品具備抑菌功效。,C6
穩(wěn)定性測(cè)試方式,C6.1
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),C6.1.1
當(dāng)然備用：將原包裝試品置室內(nèi)溫度下最少1年，半年開(kāi)展抗菌或除菌功能測(cè)試。,C6.1.2
加快實(shí)驗(yàn)：將原包裝試品置54-57℃恒溫箱內(nèi)14天或37-40℃恒溫箱內(nèi)3個(gè)月，維持空氣濕度＞75%，開(kāi)展抗菌或除菌功能測(cè)試。,C6.2
點(diǎn)評(píng)規(guī)范,商品經(jīng)當(dāng)然備用，其除菌率或抗菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標(biāo)值，商品的除菌或殺菌作用在室內(nèi)溫度下的維持時(shí)間即是當(dāng)然備用時(shí)間。,商品經(jīng)54℃加快實(shí)驗(yàn)，其除菌率或抗菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標(biāo)值，商品的殺菌或抑菌作用在室溫下最少維持一年。,產(chǎn)品經(jīng)37℃加快實(shí)驗(yàn)，其殺菌率或抗菌率做到附錄C3或附錄C4、附錄C5中要求的指標(biāo)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌作用在室溫下最少維持二年。,
,式中：c――標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度，ug/mL；, k
――稀釋倍數(shù)；, t
――室內(nèi)溫度，℃。,D4.2
試品解決,最少取2個(gè)最少包裝商品，將其剪下來(lái)，任意精準(zhǔn)稱(chēng)量3g，放進(jìn)提純器皿中，添加5mL雙蒸水，充足混勻，置放4h或震蕩30min備用。如被檢試品為吸水樹(shù)脂原材料商品，科適度提升雙蒸水量，以保證 最少可吸出1mL樣液。,D4.3
剖析,待儀器設(shè)備平穩(wěn)后，在一樣標(biāo)準(zhǔn)下，環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體各氣相1.0ML，待剖析試品（溶液）各氣相2uL，每一樣液平行面作2次測(cè)量。,依據(jù)保存期判定，依據(jù)峰總面積（或基線(xiàn)噪聲）開(kāi)展定量分析測(cè)算，取均值。,D4.4
測(cè)算,以所進(jìn)環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣的mg（ug）數(shù)對(duì)個(gè)人所得峰總面積（或基線(xiàn)噪聲）作環(huán)氧乙烷工作中曲線(xiàn)圖。,以試品中環(huán)氧乙烷相匹配的峰總面積（或基線(xiàn)噪聲）在工作中曲線(xiàn)圖上求取環(huán)氧乙烷的量A（ug），并且以式（D2）求取商品中環(huán)氧乙烷的含量。, 
,式中：X――商品環(huán)氧乙烷含量，ug/g；, A
――從工作中曲線(xiàn)圖中常查出來(lái)環(huán)氧乙烷量，ug；, M
――所取試品量，g；,V
（萃）
――提取液容積，mL；,V
（進(jìn)）
――進(jìn)樣量，mL。, ,（規(guī)范的附則）,工作環(huán)境取樣與測(cè)試標(biāo)準(zhǔn),E1
氣體取樣與測(cè)試標(biāo)準(zhǔn),E1.1
試品收集,在動(dòng)態(tài)性下開(kāi)展。,房間內(nèi)總面積不超過(guò)30m2，在直線(xiàn)里設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外點(diǎn)部位離墻1米；房間內(nèi)總面積超出30m2，設(shè)東、西、南、北、中5點(diǎn)，周邊4點(diǎn)距墻1米。,取樣時(shí)，將含營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液的平板電腦（直徑9cm）置取樣點(diǎn)（約桌面上高寬比），開(kāi)啟平皿蓋，使平板電腦在空氣中曝露5min。,E1.2
尿培養(yǎng),在取樣前將準(zhǔn)備好的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液置35℃±2℃塑造24小時(shí)，取下查驗(yàn)有零污染，將環(huán)境污染培養(yǎng)液去除。,將已收集的培養(yǎng)液在6小時(shí)內(nèi)送試驗(yàn)室，于35℃±2℃塑造48h觀(guān)查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細(xì)菌菌落數(shù)。,E1.3
菌體測(cè)算, 
,
式中：y1――空氣中細(xì)菌菌落數(shù)量，cfu/m3；, A
――平板電腦上均值細(xì)菌菌落數(shù)；, S1
――平板電腦總面積，cm2；, t
――曝露時(shí)間，min。,E2
操作臺(tái)表層與職工手表層取樣與測(cè)試標(biāo)準(zhǔn),E2.1
試品收集,操作臺(tái)：將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5厘米*5厘米的滅菌規(guī)格型號(hào)板放到被檢物件表面，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其中擦抹10次，隨后剪去手觸碰一部分棉簽，將棉簽放進(jìn)含十米L滅菌生理鹽水的取樣管中復(fù)檢。,E2.2
細(xì)菌菌落數(shù)量檢驗(yàn),將已收集的試品在6小時(shí)內(nèi)送試驗(yàn)室，每一個(gè)取樣管充足攪拌后取1米L樣液，放進(jìn)滅菌平皿內(nèi)，竭盡營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液，每一個(gè)試品平行面打疫苗二塊平皿，置35℃±2℃塑造48h觀(guān)查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細(xì)菌菌落數(shù)。, 
,式中：y2――操作臺(tái)表面細(xì)菌菌落數(shù)量，cfu/cm2；, A
――平板電腦上均值細(xì)菌菌落數(shù)；, S2
――取樣總面積，cm2；, y3
――職工手表面細(xì)菌菌落數(shù)量，cfu/支手。,E2.3
病原菌檢驗(yàn),按本規(guī)范附則B開(kāi)展。, ,（規(guī)范的附則）,消毒殺菌實(shí)際效果微生物檢測(cè)評(píng)價(jià)方法,F1
環(huán)氧乙烷消毒殺菌,F1.1
環(huán)氧乙烷消毒殺菌實(shí)際效果點(diǎn)評(píng)用微生物指示菌為枯草桿菌灰黑色變異芽胞（ATCC 9372）。在菌量為5*105-5*106cfu/片、環(huán)氧乙烷濃度值為600Mg/L±30mg/L、功效溫度為54℃±2℃、空氣濕度為60%±10%標(biāo)準(zhǔn)下，其消滅90%微生物所需時(shí)間D值應(yīng)是2.5-5.8米in，生存時(shí)間≥7.5min，殺滅時(shí)間≤58min。,F1.2
每一次檢測(cè)最少布線(xiàn)10片生物指示劑，放于較難消滅處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗鷹眼俠骨頭湯細(xì)胞培養(yǎng)液作判定檢驗(yàn)或打疫苗營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗(yàn)，將沒(méi)有處理陽(yáng)性對(duì)照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)有菌生長(zhǎng)發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀(guān)查7天所有無(wú)菌檢測(cè)生長(zhǎng)發(fā)育，可匯報(bào)生物指示劑塑造呈陰性，消毒殺菌達(dá)標(biāo)。定量分析塑造試品與陽(yáng)性對(duì)照對(duì)比消滅指數(shù)值做到103也可匯報(bào)消毒殺菌達(dá)標(biāo)。,F2
電磁波輻射消毒殺菌,F2.1
電磁波輻射消毒殺菌實(shí)際效果點(diǎn)評(píng) 用微生物指示菌為簡(jiǎn)短鏈球菌芽胞E601（ATCC 27142），在菌量為5*105-5*106cfu/口腔上皮細(xì)胞，其消滅90%微生物所需使用量D10值應(yīng)是1.5kGy。,F2.2
每一次檢測(cè)最少選5箱，每件商品布線(xiàn)3片生物指示劑，置最少使用量處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗營(yíng)養(yǎng)成分骨頭湯細(xì)胞培養(yǎng)液作判定檢驗(yàn)或打疫苗營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗(yàn)，將沒(méi)有處理陽(yáng)性對(duì)照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)有菌生長(zhǎng)發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀(guān)查7天所有無(wú)菌檢測(cè)生長(zhǎng)發(fā)育，可匯報(bào)生物指示劑塑造呈陰性，消毒殺菌達(dá)標(biāo)。定量分析塑造試品與陽(yáng)性對(duì)照對(duì)比消滅指數(shù)值做到103也可匯報(bào)消毒殺菌達(dá)標(biāo)。,F3
工作壓力蒸汽消毒,參考GB15981-1995的要求實(shí)行。, ,附則G,（規(guī)范的附則）,培養(yǎng)液與具體制取,G1
營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液,成份：,
蛋白胨 20g,
牛肉膏 4g,
氧化鈉 5G,
瓊脂 15g-40g,
純凈水 100mL,制作方法：除瓊脂外別的成份融解于純凈水中，調(diào)pH至7.2-7.4，添加瓊脂，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲(chǔ)備用。,G2
乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管,成份：,
蛋白胨 40g,
豬膽鹽（或牛、羊膽鹽） 5G,
乳清蛋白 20g, 0.04%
溴甲酚紫溶液 25mL,
純凈水 加至100mL,制作方法：將蛋白胨、膽鹽及乳清蛋白溶解水里，校準(zhǔn)pH至7.4，添加顯色劑，散裝沒(méi)管五十米L，并放進(jìn)一個(gè)小倒管，115℃殺菌15min，即得。,G3
乳清蛋白發(fā)醇管,成份：,
蛋白胨 40g,
乳清蛋白 20g, 0.04%
溴甲酚紫溶液 25mL,
純凈水 加至100mL,制作方法：將蛋白胨及乳清蛋白溶解水里，校準(zhǔn)pH至7.4，添加顯色劑，散裝每管十米L，并放進(jìn)一個(gè)小倒管，115℃殺菌15min，即得。,G4
伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）,成份：,
蛋白胨 20g,
乳清蛋白 20g,
磷酸氫二鉀 3g,
瓊脂 17g, 2%
伊紅Y水溶液 50mL,0.65%
美藍(lán)水溶液 十米L,
純凈水 加至100mL,制作方法：將蛋白胨、聚磷酸鹽和瓊脂融解于純凈水中，校準(zhǔn)pH至7.1，散裝與蒸發(fā)皿內(nèi)，121℃殺菌15min預(yù)留，臨用時(shí)添加乳清蛋白并加溫融化瓊脂，冷至55℃，添加伊紅和美藍(lán)水溶液混勻，竭盡平板電腦。,G5 SCDLP
液體培養(yǎng)基,成分：,
opo結(jié)構(gòu)脂胨 17 g,
黃豆蛋白胨 3 g,
氧化鈉 5 g,
磷酸氫二鉀 2.5 g,
葡萄糖水 2.5 g,大豆卵磷脂 1 g,
吐溫80 7 g ,
純凈水 1000 mL,制作方法：將各種各樣成分混和(如無(wú)opo結(jié)構(gòu)脂胨和黃豆蛋白胨能用日本多胨替代)，加溫融解，調(diào)pH至7.2～7.3，散裝，121℃殺菌20min，混勻，防止吐溫80沉到底端，冷至25℃后應(yīng)用。,G6
十六烷三羥基溴化銨培養(yǎng)液,成分：,牛肉膏 3 g,
蛋白胨 10 g,
氧化鈉 5 g,
十六烷三羥基溴銨 0.3 g,
瓊脂 20 g,
純凈水 1000 mL,制作方法：除瓊脂外，以上各成份混和加溫融解，調(diào)pH至7.4～7.6，隨后添加瓊脂，115℃殺菌20 min，冷至55℃上下竭盡平皿。,G7
綠膿菌素測(cè)量用培養(yǎng)液斜坡,成份：,
蛋白胨 20 g,
氧化鎂 1.4 g,
硫酸銨 10 g,
瓊脂 18 g,
凡士林(化學(xué)純) 20g,
純凈水 加至1 000 mL,制作方法：將蛋白胨、氧化鎂和硫酸銨加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加瓊脂和凡士林，加溫融解，散裝試管嬰兒，115℃殺菌20 min，做成斜坡預(yù)留。G8 果膠培養(yǎng)液,成分：,
牛肉膏 3 g,
蛋白胨 5 g,
果膠 120 g,
純凈水 1 000 mL,制作方法：各成分添加純凈水中泡浸20 min，加溫拌和融解，調(diào)pH至7.4，5 mL散裝試管嬰兒中，115℃ 殺菌20 min，站立做成高層住宅預(yù)留。,G9
磷酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)液,成分：,
蛋白胨 10 g,
酵母浸膏 3 g,
硝酸鉀 2 g,
亞硝酸鈉 0.5 g,
純凈水 1000 mL,制作方法：將蛋白胨與酵母浸膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.2，燒開(kāi)過(guò)慮后補(bǔ)充水率，添加硝酸鉀和亞硝酸鈉融解勻稱(chēng)，散裝到有小倒管的試管嬰兒中，115℃殺菌20 min預(yù)留。,G10
血瓊脂培養(yǎng)液,成分：,營(yíng)養(yǎng)瓊脂 100 mL,
脫化學(xué)纖維羊血(或兔血) 10 mL,制作方法：將殺菌后的營(yíng)養(yǎng)瓊脂加溫融化，涼至55℃上下，用無(wú)菌檢測(cè)方式將10 mL脫化學(xué)纖維血添加后混勻，竭盡平皿置電冰箱預(yù)留。,G11
甘露醇發(fā)醇培養(yǎng)液,成分：,
蛋白胨 10 g,
牛肉膏 5 g,
氧化鈉 5 g,
甘露醇 10 g, 0.2
％溴麝香草酚藍(lán)水溶液 12 mL,純凈水 1000 mL,
制作方法：將蛋白胨、氧化鈉、牛肉膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加甘露醇和溴麝香草酚藍(lán)攪拌后，散裝試管嬰兒，115℃殺菌20 min預(yù)留。,G12
葡萄糖水骨頭湯,成分：, 蛋白胨 10 g,
牛肉膏 5 g,
氯化鈉 5 g,
葡萄糖水 10 g,純凈水 1000 mL,制作方法：以上成份溶解純凈水中，調(diào)pH至7.2～7.4，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲(chǔ)備用。,G13
兔血液,制作方法：取殺菌3.8％三聚磷酸鈉1份，兔全血4份，攪拌靜放，3 000 r/min抽濾5 min，取上清，棄血球。,G14
沙氏瓊脂培養(yǎng)液,
蛋白胨 10 g,
葡萄糖水 40g,
瓊脂 40g,純凈水 1000 mL,用700 mL純凈水將瓊脂融解，300 mL純凈水將葡萄糖水與蛋白胨融解，混和以上兩一部分，混勻后散裝，115℃殺菌15 min，即得。應(yīng)用前，用過(guò)慮殺菌方式添加0.1g/L的氯霉素或是0.03g/L的氨芐青霉素。,判定實(shí)驗(yàn)選用沙氏細(xì)胞培養(yǎng)液，即除不用瓊脂外別的成份與制作方法跟上面一樣。,G15
營(yíng)養(yǎng)成分骨頭湯細(xì)胞培養(yǎng)液,
蛋白胨 10 g,
氧化鈉 5 g,
牛肉膏 3 g,純凈水 1000 mL,調(diào)整pH使殺菌后為7.2～7.4，散裝，115℃殺菌30 min，即得。,G16
溴甲酚紫葡萄糖水蛋白胨水培養(yǎng)液,
蛋白胨 10 g,
葡萄糖水 5G,純凈水 1000 mL,調(diào)整pH至7.0～7.2，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL，115℃ 殺菌30 min，即得。,G17
革蘭氏染色液,結(jié)晶紫上色液：,結(jié)晶紫 1 g, 95
％酒精 20 mL, 1
％草酸銨溶液 80 mL ,將結(jié)晶紫融解于酒精中，隨后與草酸銨水溶液混和。,革蘭氏碘液：,結(jié)晶紫 1 g,碘 1 g,
碘化鉀 2 g,
純凈水 300 mL,脫色劑,95
％酒精,復(fù)染色液：,(1)
沙黃復(fù)染色液：,沙黃 0.25 g, 95
％酒精 10 mL,純凈水 90 mL,將沙黃融解于酒精中，隨后用純凈水稀釋液。,(2)
稀石炭酸復(fù)紅液,稱(chēng)量偏堿復(fù)紅20g，研細(xì)，加95％酒精100mL，置放留宿，過(guò)濾紙過(guò)慮。取該液十米L，加5％石炭酸溶液90mL混和，即是石炭酸復(fù)紅液。再取此液十米L，放水90mL，即是稀石炭酸復(fù)紅液。,G18 0.03 mol/L
聚磷酸鹽緩沖溶液（PBS，pH7.2）,成份：,磷酸氫二鈉 2.83 g,
磷酸二氫鉀 1.36 g,
純凈水 1000 mL,一次性使用日用品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) GB15979-2002
前 言
本規(guī)范全篇強(qiáng)制性
GB15979-1995《一次性使用衛(wèi)生 用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》自1996年公布至今，使制造業(yè)企業(yè)確立了衛(wèi)生要求和總體目標(biāo)，管理方法單位 也擁有監(jiān)管檢驗(yàn)根據(jù)，對(duì)促進(jìn)該領(lǐng)域的身心健康發(fā)展趨勢(shì)與環(huán)境衛(wèi)生水準(zhǔn)的提升 具有了積極主動(dòng)功效。此外，伴隨著產(chǎn)品品種與原材料的發(fā)展趨勢(shì)，該規(guī)范有一些地區(qū)必須健全。因而明確提出修訂本規(guī)范。
本規(guī)范自執(zhí)行之日起替代GB1579-1995.
本規(guī)范的附則A至附則G為規(guī)范的附則。
本規(guī)范由我國(guó)國(guó)家衛(wèi)生部明確提出。
本規(guī)范承擔(dān)擬定企業(yè)：上海疾病防治監(jiān)測(cè)中心；參與擬定企業(yè)：寶潔（我國(guó)）有限責(zé)任公司、強(qiáng)生公司（我國(guó)）有限責(zé)任公司。
本規(guī)范關(guān)鍵起草人：沈偉、盧敏、楊宏平、縝密、潘希和、劉育京。
我國(guó)國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
一次性使用日用品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) GB15979-2002
Hygienic standard for disposable sanitary products 替代GB15979-1995
本標(biāo)準(zhǔn)了一次性使用日用品的商品和工作環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、消毒殺菌實(shí)際效果微生物檢測(cè)點(diǎn)評(píng)規(guī)范和相對(duì)檢測(cè)方式，及其原料與商品生產(chǎn)制造、消毒殺菌、存儲(chǔ)、運(yùn)送全過(guò)程衛(wèi)生要求和商品標(biāo)志規(guī)定。
在本規(guī)范中，一次性使用日用品就是指：
本規(guī)范應(yīng)用與中國(guó)從業(yè)一次性使用衛(wèi)生用品的生產(chǎn)制造與市場(chǎng)銷(xiāo)售的單位、企業(yè)或本人，也適用經(jīng)銷(xiāo)商進(jìn)口一次性使用衛(wèi)生用品的單位、企業(yè)或本人。
以下標(biāo)準(zhǔn)所包括的條文，根據(jù)在本標(biāo)準(zhǔn)中引入而組成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版發(fā)行時(shí)，所顯示版本均為合理。全部標(biāo)準(zhǔn)都是會(huì)被修定，應(yīng)用本標(biāo)準(zhǔn)的個(gè)方應(yīng)討論應(yīng)用以下標(biāo)準(zhǔn)全新版本的概率。
GB 15981-1995 消毒與滅菌實(shí)際效果的評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)
本標(biāo)準(zhǔn)選用以下界定。
一次性使用衛(wèi)生用品
應(yīng)用一次后即丟掉的、與身體立即或間接接觸的、并為做到人體系統(tǒng)環(huán)境衛(wèi)生或衛(wèi)生防疫（抑菌或抗菌）目地而應(yīng)用的各種各樣日常日常生活用品，商品特性能夠是固態(tài)還可以使液態(tài)。比如，一次性使用膠手套或護(hù)指（包含衛(wèi)生護(hù)墊）、尿不濕等糞便衛(wèi)生用品（不包括平穩(wěn)紙巾等洗手間拿紙）、安全套等，在本標(biāo)準(zhǔn)中統(tǒng)稱(chēng)之為“衛(wèi)生用品”。
4.1 外型務(wù)必干凈整潔，合乎該衛(wèi)生用品原有特性，不可有出現(xiàn)異常味道與臟東西。
4.2 不可對(duì)肌膚與黏膜造成欠佳刺激性與人民反映以及他危害功效。
4.3 商品須合乎表1中分子生物學(xué)指標(biāo)值。
表1
| 產(chǎn)品品種 |
微生物菌種指標(biāo)值 |
||||
| 原始環(huán)境污染菌1) cfu/g |
細(xì)菌菌落數(shù)量cfu/g或cfu/mL |
大腸桿菌 |
高致病潰爛菌2） |
細(xì)菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL |
|
| 手套或指套、衛(wèi)生紙、濕巾紙、內(nèi)褲、電話(huà)膜 抑菌（或抗菌）液態(tài)商品 衛(wèi)生濕巾 防護(hù)口罩 普通 消毒殺菌級(jí) 女性生理期日用品 普通 消毒殺菌級(jí) 尿不濕等糞便日用品 普通 消毒殺菌級(jí) 安全套 |
≤10000
≤10000
≤10000 |
≤200 ≤200 ≤20
≤200 ≤20
≤200 ≤20
≤200 ≤20 ≤20 |
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出 |
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出
不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出 不可驗(yàn)出 |
≤100 ≤100 不可檢出
≤100 不可檢出
≤100 不可檢出
≤100 不可檢出 不可檢出 |
| 1）如初見(jiàn)環(huán)境污染菌超出表內(nèi)標(biāo)值，應(yīng)相對(duì)提升 消滅指數(shù)值使做到本標(biāo)準(zhǔn)的病菌與細(xì)菌限制值。 2）高致病潰爛菌指綠膿桿菌、橙黃色鏈球菌與血溶鏈球菌感染。 |
|||||
4.4 衛(wèi)生濕巾除務(wù)必做到表1中的分子生物學(xué)規(guī)范外，對(duì)大腸埃希菌和橙黃色鏈球菌的消滅率須≥90%，如需標(biāo)出對(duì)細(xì)菌的功效，還須對(duì)白色念珠菌的消滅率≥90%，其抑菌作用在室內(nèi)溫度下最少須維持1年。
4.5 抑菌（或抗菌）商品出務(wù)必做到表1中的類(lèi)似平級(jí)商品分子生物學(xué)規(guī)范外，對(duì)大腸埃希菌和橙黃色鏈球菌的抗菌率須≥50%（總混性）或＞26%（非溶出性），如需標(biāo)出對(duì)細(xì)菌的功效， 還須白色念珠菌的抗菌率≥50%（總混性）或＞26%（非溶出性），其殺菌作用在室內(nèi)溫度下最少須維持1年。
4.6 一切經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒殺菌的日用品原廠(chǎng)時(shí)，環(huán)氧乙烷含量務(wù)必≤250ug/g。
5.1 安裝與包裝生產(chǎn)車(chē)間空氣中細(xì)菌菌落數(shù)量應(yīng)≤2500cfu/m3.
5.2 操作臺(tái)表層細(xì)菌菌落數(shù)量應(yīng)≤20cfu/cm2.
5.3 職工手表層細(xì)菌菌落數(shù)量應(yīng)≤300cfu/支手，并不可檢出病原菌。
6.1 環(huán)氧乙烷消毒：對(duì)枯草桿菌灰黑色變異芽胞（ATCC 9372）的消滅指數(shù)值≥103.
6.2 電磁波輻射消毒：對(duì)簡(jiǎn)短鏈球菌芽胞E6d（ATCC 27142）的消滅指數(shù)值應(yīng)≥103.
6.3 工作壓力蒸氣消毒：對(duì)嗜熱人體脂肪鏈球菌（ATCC 7953）的消滅指數(shù)值應(yīng)≥103.
7.1 商品測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
7.1.1 商品外型：估測(cè)，應(yīng)合乎本規(guī)范3.1的要求。
7.1.2 商品毒理測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：見(jiàn)附則A。
7.1.3 商品微生物檢驗(yàn)方式：見(jiàn)附則B。
7.1.4 商品除菌特性、抗菌特性與穩(wěn)定性測(cè)試方式：見(jiàn)附則C。
7.1.5 商品環(huán)氧乙烷含量測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：見(jiàn)附則D。
7.2 工作環(huán)境取樣與測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)：見(jiàn)附則E。
7.3 消毒實(shí)際效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)方式：見(jiàn)附則F。
8.1 原料應(yīng)無(wú)毒性、沒(méi)害、零污染；原料包裝應(yīng)清理，清晰說(shuō)明含有物的名字、生產(chǎn)制造企業(yè)、生產(chǎn)制造日期或生產(chǎn)日期；危害環(huán)境衛(wèi)生醫(yī)治的與原料應(yīng)不外露；有特別要求的原料應(yīng)標(biāo)出儲(chǔ)存標(biāo)準(zhǔn)和保存期。
8.2 對(duì)危害商品環(huán)境衛(wèi)生品質(zhì)的原料應(yīng)該有相對(duì)檢測(cè)報(bào)告或證明文件，必需時(shí)要開(kāi)展微生物監(jiān)管和采取有效對(duì)策。
8.3 嚴(yán)禁應(yīng)用廢料的日用品作原料或半成品加工。
9.1 廠(chǎng)區(qū)周邊環(huán)境應(yīng)干凈整潔，無(wú)廢棄物，無(wú)蚊、蠅等蟲(chóng)害蚊蠅滋生。
9.2 廠(chǎng)區(qū)應(yīng)該有充足室內(nèi)空間達(dá)到生產(chǎn)制造必須，合理布局務(wù)必合乎生產(chǎn)工藝流程規(guī)定，切分有效，人、物分離，商品步驟中無(wú)反向與交叉式。原材料進(jìn)到與制成品出來(lái)應(yīng)該有污染治理對(duì)策和嚴(yán)苛的安全操作規(guī)程，降低生產(chǎn)環(huán)境微生物菌種環(huán)境污染。
9.3 生產(chǎn)制造區(qū)域內(nèi)應(yīng)配備合理的防污、防蛀、防鼠措施，路面、墻壁、工作中櫥柜臺(tái)面應(yīng)整平、光潔、不起塵、便于除灰與清理消毒殺菌，有充裕的照明燈具與室內(nèi)消毒或凈化處理對(duì)策，以確保生產(chǎn)環(huán)境達(dá)到本規(guī)范第5章的要求。
9.4 配備必不可少的生產(chǎn)制造和質(zhì)量檢驗(yàn)機(jī)器設(shè)備，有詳細(xì)的生產(chǎn)制造和質(zhì)量檢驗(yàn)紀(jì)錄，進(jìn)一步確保商品環(huán)境衛(wèi)生品質(zhì)。
9.5 生產(chǎn)制造過(guò)程中應(yīng)用易燃性、易燃易爆物件或造成有害物的，必不可少具有相對(duì)安全性防護(hù)措施，合乎相關(guān)法律法規(guī) 規(guī)范或要求。
9.6 原料和制成品應(yīng)分離堆積，待檢、達(dá)標(biāo)、不過(guò)關(guān)原料和制成品應(yīng)嚴(yán)苛分離堆積并設(shè)顯著標(biāo)示。庫(kù)房?jī)?nèi)要干躁、清理、自然通風(fēng)，設(shè)防蛀、防蠅設(shè)備和墊倉(cāng)板，合乎商品儲(chǔ)存標(biāo)準(zhǔn)。
9.7 進(jìn)到廠(chǎng)區(qū)要跳槽衣和勞保鞋，戴工帽，直接接觸裸裝商品的工作人員需佩戴口罩，清理和消毒殺菌兩手或戴手套；廠(chǎng)區(qū)前要相對(duì)設(shè)立更衣間、洗手臺(tái)、消毒池與緩沖區(qū)域。
9.8 從業(yè)日用品生產(chǎn)制造的工作人員應(yīng)維持清潔衛(wèi)生，不可留手指甲，工作中時(shí)不可戴飾品，長(zhǎng)頭發(fā)應(yīng)卷在工帽內(nèi)。急性腸炎、傷寒論、慢性乙型肝炎、活躍性結(jié)核病、生殖皰疹、非淋及生膿性或滲出性皮膚疾病病人或醫(yī)院病毒攜帶者不可參加立即與商品觸碰的生產(chǎn)制造主題活動(dòng)。
9.9 從業(yè)日用品生產(chǎn)制造的工作人員應(yīng)在入崗前及按時(shí)（每一年一次）開(kāi)展健康體檢與衛(wèi)生保健知識(shí)（包含生產(chǎn)制造環(huán)境衛(wèi)生、清潔衛(wèi)生、相關(guān)規(guī)范與標(biāo)準(zhǔn)）學(xué)習(xí)培訓(xùn)，錄取者即可入崗。
10.1 消毒殺菌級(jí)商品最后消毒殺菌務(wù)必選用環(huán)氧乙烷、電磁波輻射或工作壓力蒸氣等合理消毒方法。常用消毒機(jī)務(wù)必合乎相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
10.2 依據(jù)商品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、 原始環(huán)境污染菌與消毒殺菌實(shí)際效果微生物檢測(cè)點(diǎn)評(píng)規(guī)范制訂消毒殺菌程序流程、性能參數(shù)、工作規(guī)范，工作經(jīng)驗(yàn)證后嚴(yán)苛依照明確的消毒殺菌加工工藝實(shí)際操作。該消毒殺菌程序流程、性能參數(shù)或危害消毒殺菌實(shí)際效果的原料或生產(chǎn)工藝流程產(chǎn)生變化后應(yīng)再次認(rèn)證明確消毒殺菌加工工藝。
10.3 每一次消毒殺菌過(guò)程務(wù)必開(kāi)展相對(duì)的加工工藝（物理學(xué)）和有機(jī)化學(xué)顯色劑檢測(cè)，每月用相對(duì)的生物指示劑檢測(cè)，僅有當(dāng)加工工藝檢測(cè)、有機(jī)化學(xué)檢測(cè)、微生物檢測(cè)做到要求規(guī)定時(shí)，被消毒殺菌物件才可以原廠(chǎng)。
10.4 商品經(jīng)消毒殺菌解決后，外型與特性應(yīng)與消毒殺菌解決前無(wú)顯著由此可見(jiàn)的差別。
11.1 實(shí)行日用品運(yùn)送或存儲(chǔ)的企業(yè)或本人，應(yīng)嚴(yán)苛依照經(jīng)營(yíng)者出示的運(yùn)送與存儲(chǔ)規(guī)定開(kāi)展運(yùn)送或存儲(chǔ)。
11.2 立即與商品觸碰的包裝制品務(wù)必?zé)o毒性、沒(méi)害、清理，商品的全部包裝制品務(wù)必具備充足的密閉性和堅(jiān)固性以做到確保商品在一切正常的運(yùn)送與存儲(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)下不會(huì)受到環(huán)境污染的目地。
12.1 商品標(biāo)志應(yīng)合乎《中華人民共和國(guó)產(chǎn)品質(zhì)量法》的要求，并在包裝設(shè)計(jì)上標(biāo)出實(shí)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)號(hào)及其生產(chǎn)制造日期和保存期（有效期限）或生產(chǎn)日期和限制應(yīng)用日期。
12.2 消毒級(jí)商品還應(yīng)在市場(chǎng)銷(xiāo)售包裝上標(biāo)明“消毒級(jí)”字樣及其消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定應(yīng)用日期，在運(yùn)送包裝上標(biāo)出“消毒級(jí)”字樣及其消毒企業(yè)與詳細(xì)地址、消毒方式、消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定應(yīng)用日期。
（規(guī)范的附則）
商品毒理測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
A1 各種商品毒理檢測(cè)指標(biāo)值
當(dāng)原料、生產(chǎn)工藝流程等產(chǎn)生變化很有可能危害商品毒副作用時(shí)，應(yīng)按表A1依據(jù)不一樣產(chǎn)品品種出示合理的（經(jīng)政府部門(mén)評(píng)定的第三方）制成品毒結(jié)構(gòu)力學(xué)檢測(cè)報(bào)告。
表A1
| 產(chǎn)品品種 |
肌膚刺激性實(shí)驗(yàn) |
陰道粘膜刺激性實(shí)驗(yàn) |
肌膚超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn) |
| 膠手套或護(hù)指、內(nèi)褲 |
√ |
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√ |
| 抑菌（或抗菌）液態(tài)商品 |
√ |
依據(jù)主要用途挑選1） |
√ |
| 濕巾紙、衛(wèi)生濕巾 |
√ |
依據(jù)主要用途挑選1） |
依據(jù)原材料挑選 |
| 口罩 |
√ |
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| 女性生理期日用品 |
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√ |
√ |
| 尿不濕等糞便日用品 |
√ |
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√ |
| 安全套 |
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√ |
√ |
| 1）用以正確引導(dǎo)黏膜的商品須做正確引導(dǎo)黏膜刺激性實(shí)驗(yàn)，但不必做肌膚刺激性實(shí)驗(yàn)。 |
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A2 實(shí)驗(yàn)方式
肌膚刺激性實(shí)驗(yàn)、正確引導(dǎo)黏膜刺激性實(shí)驗(yàn)和肌膚超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)方式按國(guó)家衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一手冊(cè)《實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》（1999）中的“消毒液毒理試驗(yàn)技術(shù)性”中相對(duì)的實(shí)驗(yàn)方式開(kāi)展。
固態(tài)商品的試品制取方式依照A3開(kāi)展。
注
1、用以肌膚刺激性實(shí)驗(yàn)中的空白試驗(yàn)應(yīng)是：鹽水和斑紙貼。
2、在肌膚超敏反應(yīng)中，致敏解決和激起解決常用的使用量保持一致。
A3 試品制取
A3.1 肌膚刺激性實(shí)驗(yàn)和肌膚超敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)
以橫斷方法剪一塊斑貼尺寸的產(chǎn)品。針對(duì)干的產(chǎn)品，如尿不濕、女性生理期日用品，用鹽水潤(rùn)濕后貼到肌膚上，再用斑貼紙遮蓋。
A3.2 正確引導(dǎo)黏膜刺激性實(shí)驗(yàn)
A3.2.1 干的產(chǎn)品（如女性生理期日用品）
以橫斷方法裁取充足量的產(chǎn)品，按1g/十米L的占比添加殺菌鹽水，密封性于提純器皿中拌和后放置37℃±1℃下置放24小時(shí)。制冷到室內(nèi)溫度，拌和后析抽樣液備檢。
A3.2.2 濕的產(chǎn)品（如衛(wèi)生濕巾）
在開(kāi)展陰道粘膜刺激性實(shí)驗(yàn)的當(dāng)日，擠壓濕巾紙里的加上液做為試件。
A4 判斷規(guī)范
以國(guó)家衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一手冊(cè)《試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》（1999）中“毒理實(shí)驗(yàn)結(jié)果的最后判斷”的相對(duì)一部分做為實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)。
（規(guī)范的附則）
產(chǎn)品微生物檢驗(yàn)方式
B1 產(chǎn)品收集與試品解決
交于一批號(hào)的三個(gè)運(yùn)送包裝中最少提取12個(gè)最少市場(chǎng)銷(xiāo)售包裝試品，1/4試品用以檢驗(yàn)，1/4試品用以備用，另1/2試品（可就地保存）必需時(shí)用以復(fù)查。取樣的最少市場(chǎng)銷(xiāo)售包裝不應(yīng)該有裂開(kāi)，檢測(cè)前不可啟開(kāi)。
在100級(jí)凈化處理標(biāo)準(zhǔn)下要無(wú)菌檢測(cè)方式開(kāi)啟用以檢驗(yàn)的最少3個(gè)包裝，從每一個(gè)包裝中抽樣，精確稱(chēng)量20g±1g試品。剪下來(lái)后添加到200mL殺菌鹽水中，充足攪拌，獲得一個(gè)鹽水樣液。液態(tài)產(chǎn)品用源液立即做樣液。
如被檢試品帶有很多吸水樹(shù)脂原材料而造成 不可以吸出充足樣液時(shí)，封閉液量可按每一次五十米L增長(zhǎng)，直到能吸出充足檢測(cè)用樣液。在預(yù)估細(xì)菌菌落數(shù)量與細(xì)菌菌落總數(shù)時(shí)相對(duì)調(diào)節(jié)稀釋液度。
B2 細(xì)菌菌落數(shù)量與原始環(huán)境污染菌檢驗(yàn)方式
本方式適用產(chǎn)品原始環(huán)境污染菌與細(xì)菌菌落數(shù)量（下列通稱(chēng)為細(xì)菌菌落數(shù)量）檢驗(yàn)。
B2.1 操作流程
待以上鹽水 樣液當(dāng)然地基沉降后取上清液做菌落計(jì)數(shù)。共打疫苗5個(gè)平皿，每一個(gè)平皿中添加1米L樣液，隨后用制冷至45℃上下的溶化的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)基15-50mL倒入每一個(gè)平皿內(nèi)混和勻稱(chēng)。待瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平皿置35℃±2℃塑造48h后，測(cè)算平板電腦上的菌落數(shù)。
B2.2 結(jié)果匯報(bào)
菌落呈塊狀生長(zhǎng)發(fā)育的平板電腦不適合選用；記數(shù)符合規(guī)定的平板電腦上的菌落，按式（B1）數(shù)值：
式中：X1――病菌菌落數(shù)量，cfu/g或cfu/mL；
A――5塊瓊脂培養(yǎng)基版本上的病菌菌落數(shù)量；
K――稀釋液度。
當(dāng)菌落數(shù)在100之內(nèi)，按實(shí)了解匯報(bào)，超過(guò)100時(shí)才有二位有效數(shù)字。
假如試品菌落數(shù)量超出本規(guī)范的要求，按B2.3開(kāi)展復(fù)查和結(jié)果匯報(bào)。
B2.3 復(fù)查方式
將存留的復(fù)查試品依前法進(jìn)行復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果均值都做到本規(guī)范的要求，則判斷被檢試品達(dá)標(biāo)；在其中有一切1次結(jié)果均值超出本標(biāo)準(zhǔn)，則判斷被檢試品不過(guò)關(guān)。
B3 大腸桿菌檢驗(yàn)方式
B3.1 操作流程
抽樣液5mL，打疫苗五十米L乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時(shí)，如不產(chǎn)酸都不脹氣，則匯報(bào)為大腸桿菌呈陰性。
如產(chǎn)酸脹氣，則畫(huà)線(xiàn)打疫苗伊紅美藍(lán)瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時(shí)，觀(guān)查平板電腦上菌落形狀。典型性的腸子菌落為紫黑色或紅紫色，環(huán)形，邊沿齊整，表層光潔潮濕，常具備金屬質(zhì)感，也是有的呈紫黑，沒(méi)有或有點(diǎn)金屬質(zhì)感，或淡粉色，管理中心較深的菌落。
取疑是菌落1-2個(gè)作革蘭氏染色鏡檢查，另外打疫苗乳清蛋白發(fā)醇管，置35℃±2℃塑造24小時(shí)，觀(guān)察產(chǎn)氣情況。
B3.2 結(jié)果匯報(bào)
凡乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳清蛋白發(fā)醇管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍(lán)平板電腦上面有典型性沙門(mén)氏菌落，革蘭氏染色為呈陰性無(wú)枯草芽孢菌，可匯報(bào)被檢試品驗(yàn)出大腸埃希菌。
B4 綠膿桿菌檢驗(yàn)方式
B4.1 操作流程
抽樣液5mL，添加到五十米L SCDLP細(xì)胞培養(yǎng)液中，充足攪拌，置35℃±2℃塑造18-24小時(shí)。若有綠膿桿菌生長(zhǎng)發(fā)育，細(xì)胞培養(yǎng)液表層展現(xiàn)一層薄菌膜，細(xì)胞培養(yǎng)液常呈淺綠色或深藍(lán)色。從細(xì)胞培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取塑造物，畫(huà)線(xiàn)打疫苗十六烷三羥基溴化銨瓊脂平板電腦，置35℃±2℃塑造18-24小時(shí)，觀(guān)察菌體特點(diǎn)。綠膿桿菌在這里培養(yǎng)液上生長(zhǎng)發(fā)育優(yōu)良，菌體平扁，邊沿不齊，菌體周邊培養(yǎng)液有點(diǎn)淡粉色，別的菌不久。
取異常菌體玻片作革蘭氏染色，鏡檢查為革蘭氏陽(yáng)性菌陰性菌者應(yīng)開(kāi)展以下實(shí)驗(yàn)。
抗霉素實(shí)驗(yàn)：取一小塊清潔的乳白色過(guò)濾紙片放到殺菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌檢測(cè)玻棒挑取異常菌體涂在過(guò)濾紙上面，隨后在其上滴入一滴新配置的1%二甲基對(duì)苯二胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，30s內(nèi)發(fā)生淡粉色或暗紫色，為抗霉素實(shí)驗(yàn)呈陽(yáng)性，不掉色者為呈陰性。
綠膿菌素實(shí)驗(yàn)：取2-3個(gè)異常菌體，各自打疫苗在綠膿菌素測(cè)量用培養(yǎng)液斜坡，35℃±2℃塑造24小時(shí)，添加三氯甲烷3-5mL，充足震蕩使塑造物中很有可能存有的綠膿菌素融解，待三氯甲烷呈深藍(lán)色時(shí)，用塑料吸管移到另一試管嬰兒中并添加1mol/L的硫酸1米L，震蕩后靜放一會(huì)兒。如頂層發(fā)生淡粉色或暗紫色即是呈陽(yáng)性，表明有綠膿菌素存有。
（規(guī)范的附則）
商品除菌特性、抗菌特性與穩(wěn)定性測(cè)試方式
C1 試品收集
為使試品具備優(yōu)良的象征性，應(yīng)當(dāng)同一批號(hào)三個(gè)運(yùn)送包裝中最少隨機(jī)抽取20件最少市場(chǎng)銷(xiāo)售包裝試品，在其中5件備用，5件做抗菌或除菌功能測(cè)試，10件做穩(wěn)定性測(cè)試。
C2 實(shí)驗(yàn)菌與菌液制取
C2.1 實(shí)驗(yàn)菌
C2.1.1 病菌：橙黃色鏈球菌（ATCC 6538），大腸埃希菌（8099或ATCC 25922）。
C2.1.2 酵母：白色念珠菌（ATCC 10231）
菌液制?。喝【N第3-14代的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液斜坡新鮮塑造物（18-24小時(shí)），用5mL 0.03mol/L聚磷酸鹽緩沖溶液（一下通稱(chēng)PBS）洗下菌苔，使菌飄浮勻稱(chēng)后用以上PBS稀釋液至所需濃度值。
C3 除菌特性實(shí)驗(yàn)方式
該實(shí)驗(yàn)抽樣位置，依據(jù)被試商品經(jīng)營(yíng)者的表明而明確。
C3.1 還原劑評(píng)定實(shí)驗(yàn)
開(kāi)展除菌功能測(cè)試務(wù)必根據(jù)下列還原劑評(píng)定實(shí)驗(yàn)。
C3.1.1 實(shí)驗(yàn)排序
1）染菌樣照 5mL PBS
2）染菌樣照 5mL 還原劑
3）染菌對(duì)相片 5mL 還原劑
4）樣照 5mL 還原劑 染菌對(duì)相片
5）染菌對(duì)相片 5mL PBS
6）同批號(hào)PBS
7）同批號(hào)還原劑
8）同批號(hào)培養(yǎng)液
C3.1.2 點(diǎn)評(píng)要求
1）第1組無(wú)實(shí)驗(yàn)菌，或僅有極個(gè)別實(shí)驗(yàn)菌菌體生長(zhǎng)發(fā)育。
2）第2組是較第1組為多，但較第3、4、5組為少的實(shí)驗(yàn)菌體生長(zhǎng)發(fā)育，并符合規(guī)定。
3）第3、4、5組是類(lèi)似量試驗(yàn)菌生長(zhǎng)，并在1*104-9*104cfu/片中間，其小組之間菌體數(shù)誤差應(yīng)不超過(guò)15%。
4）第6-8組無(wú)菌檢測(cè)生長(zhǎng)。
5）持續(xù)3次試驗(yàn)獲得合格點(diǎn)評(píng)。
C3.2 除菌試驗(yàn)
C3.2.1 操作流程
將試驗(yàn)菌24小時(shí)斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對(duì)仍舊上面，收購(gòu) 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片）。
取被試件片（2.0cm*3.0cm）和對(duì)仍舊片（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒(méi)有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片，分為4組放置4個(gè)殺菌平皿內(nèi)。
取以上菌懸液，各自在每一個(gè)被試件片和對(duì)仍舊上面滴入100uL，勻稱(chēng)施膠，逐漸記時(shí)，功效2、5、10、20min，用無(wú)菌檢測(cè)鑷各自將樣照資金投入含5mL相對(duì)還原劑的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個(gè)稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個(gè)平皿，用涼至40-45℃的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱(chēng)，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母），干活兒菌菌落計(jì)數(shù)。
試驗(yàn)反復(fù)3次，按式（C1）測(cè)算除菌率：
X3 = （A-B）/A *100% （C1)
式中：X3――除菌率，%；
A――對(duì)比試品均值菌體數(shù)；
B――被使試品均值菌體數(shù)。
C3.2.2 點(diǎn)評(píng)規(guī)范
除菌率≥90%，商品有抑菌作用。
C4 總混性抗（抑）菌商品抗菌特性實(shí)驗(yàn)方式
C4.1 操作流程
將實(shí)驗(yàn)菌24小時(shí)斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌懸液（規(guī)定的濃度值為：用100uL滴于對(duì)仍舊上面或5mL樣液內(nèi)，收購(gòu) 菌數(shù)為1*104-9*104cfu/片或mL）。
取被試件片（2.0cm*3.0cm）或樣液（5mL）和對(duì)仍舊片或樣液（與試件同質(zhì)性原材料，同樣尺寸，但沒(méi)有抗菌材料，且經(jīng)殺菌解決）各4片（放置殺菌平皿內(nèi)）或4管。
取以上菌懸液，各自在每一個(gè)被試件片或樣液和對(duì)仍舊片或樣液上或內(nèi)滴加100uL，勻稱(chēng)施膠/混和，逐漸記時(shí)，功效2、5、10、20min，用無(wú)菌檢測(cè)鑷各自將樣照或樣液（0.5mL）資金投入含5mL PBS的試管嬰兒內(nèi)，充足攪拌，作適度稀釋液，隨后取在其中2-3個(gè)稀釋液度，各自汲取0.5mL，放置2個(gè)平皿，用涼至40-45℃的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液（病菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)液（酵母）15mL作竭盡，旋轉(zhuǎn)平皿，使其充足勻稱(chēng)，瓊脂凝結(jié)后旋轉(zhuǎn)平板電腦，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母），干活兒菌菌落計(jì)數(shù)。
實(shí)驗(yàn)反復(fù)3次，按式（C2）測(cè)算抗菌率
X4 = ( A-B ) / A * 100 （C2)
式中：X4――抗菌率，%；
A――對(duì)比試品均值菌體數(shù)；
B――被試試品均值菌體數(shù)。
C4.2 點(diǎn)評(píng)規(guī)范
抗菌率≥50%-90%，商品有殺菌作用，抗菌率≥90%，商品有較強(qiáng)殺菌作用。
C5 非溶出性抗（抑）菌商品抗菌特性實(shí)驗(yàn)方式
C5.1 操作流程
稱(chēng)量被試件片（裁成1.0cm*1.0cm尺寸）0.75g散裝包好。
將0.75g重樣照放進(jìn)一個(gè)250ML的三角燒瓶中，各自添加70mL PBS和5mL菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度值為1*104-9*104cfu/ mL。
將三角燒瓶固定不動(dòng)于震蕩搖床邊，以300r/min振搖1h。
取0.5mL振搖后的樣液，或用PBS做適度稀釋液后的樣液，以瓊脂竭盡法打疫苗平皿，開(kāi)展菌落計(jì)數(shù)。
另外設(shè)對(duì)仍舊片組和不用樣照組，對(duì)仍舊片組的對(duì)仍舊片與被試件片一樣尺寸但沒(méi)有抑菌成份，別的操作流程均與被試件片組同樣，不用樣照組各自取5mL菌懸液和70mL PBS添加一個(gè)250ML三角燒瓶中，攪拌，各自于0時(shí)間和震蕩1h后，各取0.5mL菌懸液與PBS的溶液做適度稀釋液，隨后開(kāi)展菌落計(jì)數(shù)。
實(shí)驗(yàn)反復(fù)3次，按式（C3）計(jì)算抑菌率：
X5 = （A ? B）/A * 100% (C3)
式中： X5――抑菌率，%；
A――被試試品震蕩前均值菌體數(shù)；
B――被試試品震蕩后均值菌體數(shù)。
C5.2 點(diǎn)評(píng)規(guī)范
不用樣照組的菌體數(shù)在1*104-9*104cfu/ mL中間，且試品震蕩前后左右均值菌體數(shù)誤差在10%之內(nèi)，實(shí)驗(yàn)合理；被試件片組抑菌率與對(duì)仍舊片組抑菌率的誤差＞26%，商品具備抑菌功效。
C6 穩(wěn)定性測(cè)試方式
C6.1 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)
C6.1.1 當(dāng)然備用：將原包裝試品置室內(nèi)溫度下最少1年，半年開(kāi)展抑菌或除菌功能測(cè)試。
C6.1.2 加快實(shí)驗(yàn)：將原包裝試品置54-57℃恒溫箱內(nèi)14天或37-40℃恒溫箱內(nèi)3個(gè)月，維持空氣濕度＞75%，開(kāi)展抑菌或除菌功能測(cè)試。
C6.2 點(diǎn)評(píng)規(guī)范
商品經(jīng)當(dāng)然備用，其除菌率或抑菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標(biāo)值，商品的除菌或抑菌功效在室內(nèi)溫度下的維持時(shí)間即是當(dāng)然備用時(shí)間。
商品經(jīng)54℃加快實(shí)驗(yàn)，其除菌率或抑菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標(biāo)值，商品的除菌或抑菌功效在室內(nèi)溫度下最少維持一年。
商品經(jīng)37℃加快實(shí)驗(yàn)，其除菌率或抑菌率做到附則C3或附則C4、附則C5中要求的指標(biāo)值，產(chǎn)品的除菌或抑菌作用在室內(nèi)溫度下最少維持二年。
（規(guī)范的附錄）
產(chǎn)品環(huán)氧乙烷含量測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
D1 檢測(cè)目地
明確產(chǎn)品消毒殺菌后開(kāi)啟時(shí)間，當(dāng)新產(chǎn)品或原料、消毒殺菌加工工藝更改很有可能危害產(chǎn)品物理化學(xué)特性時(shí)應(yīng)予以檢測(cè)。
D2 試品收集
環(huán)氧乙烷消毒殺菌后，馬上從統(tǒng)一消毒殺菌生產(chǎn)批號(hào)的三個(gè)紙袋包裝中隨機(jī)抽取一定量小袋裝試品，取樣量最少應(yīng)達(dá)到要求所需測(cè)量頻次的量（留一定量在必需時(shí)開(kāi)展進(jìn)行復(fù)測(cè)用）。
各自于環(huán)氧乙烷消毒殺菌后24小時(shí)及之后每過(guò)數(shù)日開(kāi)展含量測(cè)量，直到含量降至本規(guī)范4.6所要求的指標(biāo)值下列。
D3 儀器設(shè)備與實(shí)際操作標(biāo)準(zhǔn)
儀器設(shè)備：氣相色譜、氫焰探測(cè)器（FID）
柱：Choromosorb 101 HP60-80目；夾層玻璃柱長(zhǎng)1m，Φ3nm。柱溫：120℃.
探測(cè)器：150℃。
氣化器：150℃。
載供氣量：N2：35mL/min。
氡氣：35mL/min。
氣體：350ML/min。
柱前壓約為109kPa。
D4.1 規(guī)范配置
用100mL夾層玻璃針管從純環(huán)氧乙烷小氣瓶中提取環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體（反復(fù)放空自己二次，以清除原來(lái)氣體），塞外橡皮頭，用十米L針管提取以上100mL針管中純環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體十米L，用氮?dú)庀♂尩?/span>100mL（可將十米L標(biāo)準(zhǔn)氣引入到現(xiàn)有90mL氮?dú)獾膸鹌と^的針管中進(jìn)行）。用一樣的方式依據(jù)必須再逐步稀釋2-3次（稀釋1000-10000倍），作三個(gè)濃度值的標(biāo)準(zhǔn)氣體。按環(huán)氧乙烷小氣瓶中環(huán)氧乙烷的純凈度、稀釋倍率和室內(nèi)溫度測(cè)算出最終標(biāo)準(zhǔn)氣中的環(huán)氧乙烷濃度值。
計(jì)算方法以下：
式中：c――標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度值，ug/mL；
k――稀釋倍率；
t――室內(nèi)溫度，℃。
D4.2 試品解決
最少取2個(gè)最少包裝商品，將其剪下來(lái)，任意精準(zhǔn)稱(chēng)量3g，放進(jìn)提純器皿中，添加5mL雙蒸水，充足混勻，置放4h或震蕩30min備用。如被檢試品為吸水樹(shù)脂原材料商品，科適度提升雙蒸水量，以保證 最少可吸出1mL樣液。
D4.3 剖析
待儀器設(shè)備平穩(wěn)后，在一樣標(biāo)準(zhǔn)下，環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體各氣相1.0ML，待剖析試品（溶液）各氣相2uL，每一樣液平行面作2次測(cè)量。
依據(jù)保存期判定，依據(jù)峰總面積（或基線(xiàn)噪聲）開(kāi)展定量分析測(cè)算，取均值。
D4.4 測(cè)算
以所進(jìn)環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣的mg（ug）數(shù)對(duì)個(gè)人所得峰總面積（或基線(xiàn)噪聲）作環(huán)氧乙烷工作中曲線(xiàn)圖。
以試品中環(huán)氧乙烷相匹配的峰總面積（或基線(xiàn)噪聲）在工作中曲線(xiàn)圖上求取環(huán)氧乙烷的量A（ug），并且以式（D2）求取商品中環(huán)氧乙烷的含量。
式中：X――商品環(huán)氧乙烷含量，ug/g；
A――從工作中曲線(xiàn)圖中常查出來(lái)環(huán)氧乙烷量，ug；
M――所取試品量，g；
V（萃）――提取液容積，mL；
V（進(jìn)）――進(jìn)樣量，mL。
（規(guī)范的附則）
工作環(huán)境取樣與測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
E1 氣體取樣與測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
E1.1 試品收集
在動(dòng)態(tài)性下開(kāi)展。
房間內(nèi)總面積不超過(guò)30m2，在直線(xiàn)里設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外點(diǎn)部位離墻1米；房間內(nèi)總面積超出30m2，設(shè)東、西、南、北、中5點(diǎn)，周邊4點(diǎn)距墻1米。
取樣時(shí)，將含營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液的平板電腦（直徑9cm）置取樣點(diǎn)（約桌面上高寬比），開(kāi)啟平皿蓋，使平板電腦在空氣中曝露5min。
E1.2 尿培養(yǎng)
在取樣前將準(zhǔn)備好的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液置35℃±2℃塑造24小時(shí)，取下查驗(yàn)有零污染，將環(huán)境污染培養(yǎng)液去除。
將已收集的培養(yǎng)液在6小時(shí)內(nèi)送試驗(yàn)室，于35℃±2℃塑造48h觀(guān)查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細(xì)菌菌落數(shù)。
E1.3 菌體測(cè)算
式中：y1――空氣中細(xì)菌菌落數(shù)量，cfu/m3；
A――平板電腦上均值細(xì)菌菌落數(shù)；
S1――平板電腦總面積，cm2；
t――曝露時(shí)間，min。
E2 操作臺(tái)表層與職工手表層取樣與測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
E2.1 試品收集
操作臺(tái)：將經(jīng)殺菌的內(nèi)徑為5厘米*5厘米的殺菌規(guī)格型號(hào)板放到被檢物件表層，用一浸有殺菌鹽水的棉球在其中擦抹10次，隨后剪去手觸碰一部分棉簽，將棉球放進(jìn)含十米L殺菌鹽水的取樣管中復(fù)檢。
E2.2 細(xì)菌菌落數(shù)量檢驗(yàn)
將已收集的試品在6小時(shí)內(nèi)送試驗(yàn)室，每一個(gè)取樣管充足攪拌后取1米L樣液，放進(jìn)殺菌平皿內(nèi)，竭盡營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液，每一個(gè)試品平行面打疫苗二塊平皿，置35℃±2℃塑造48h觀(guān)查結(jié)果，記數(shù)平板電腦上細(xì)菌菌落數(shù)。
式中：y2――操作臺(tái)表層細(xì)菌菌落數(shù)量，cfu/cm2；
A――平板電腦上均值細(xì)菌菌落數(shù)；
S2――取樣總面積，cm2；
y3――職工手表層細(xì)菌菌落數(shù)量，cfu/支手。
E2.3 病原菌檢驗(yàn)
按本規(guī)范附則B開(kāi)展。
（規(guī)范的附錄）
消毒殺菌實(shí)際效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)方法
F1 環(huán)氧乙烷消毒殺菌
F1.1 環(huán)氧乙烷消毒殺菌實(shí)際效果點(diǎn)評(píng)用生物指示菌為枯草桿菌灰黑色變異芽胞（ATCC 9372）。在菌量為5*105-5*106cfu/片、環(huán)氧乙烷濃度值為600Mg/L±30mg/L、功效溫度為54℃±2℃、空氣濕度為60%±10%標(biāo)準(zhǔn)下，其消滅90%微生物所需時(shí)間D值應(yīng)是2.5-5.8米in，生存時(shí)間≥7.5min，消滅時(shí)間≤58min。
F1.2 每一次檢測(cè)最少布線(xiàn)10片生物顯色劑，放于較難消滅處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗鷹眼俠骨頭湯細(xì)胞培養(yǎng)液作判定檢驗(yàn)或打疫苗營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗(yàn)，將沒(méi)有處理陽(yáng)性對(duì)照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)有菌生長(zhǎng)發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀(guān)查7天所有無(wú)菌檢測(cè)生長(zhǎng)發(fā)育，可匯報(bào)生物顯色劑塑造呈陰性，消毒殺菌達(dá)標(biāo)。定量分析塑造試品與陽(yáng)性對(duì)照對(duì)比消滅指數(shù)值做到103也可匯報(bào)消毒殺菌達(dá)標(biāo)。
F2 電磁波輻射消毒殺菌
F2.1 電磁波輻射消毒殺菌實(shí)際效果點(diǎn)評(píng) 用生物指示菌為簡(jiǎn)短鏈球菌芽胞E601（ATCC 27142），在菌量為5*105-5*106cfu/口腔上皮細(xì)胞，其消滅90%微生物所需使用量D10值應(yīng)是1.5kGy。
F2.2 每一次檢測(cè)最少選5箱，每件商品布線(xiàn)3片生物顯色劑，置最少使用量處。消毒殺菌結(jié)束，取下指示菌片打疫苗營(yíng)養(yǎng)成分骨頭湯細(xì)胞培養(yǎng)液作判定檢驗(yàn)或打疫苗營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液作定量分析檢驗(yàn)，將沒(méi)有處理陽(yáng)性對(duì)照菌片作同樣打疫苗，二者均置35℃±2℃塑造。陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)有菌生長(zhǎng)發(fā)育。判定塑造試品如持續(xù)觀(guān)查7天所有無(wú)菌檢測(cè)生長(zhǎng)發(fā)育，可匯報(bào)生物顯色劑塑造呈陰性，消毒殺菌達(dá)標(biāo)。定量分析塑造試品與陽(yáng)性對(duì)照對(duì)比消滅指數(shù)值做到103也可匯報(bào)消毒殺菌達(dá)標(biāo)。
F3 工作壓力蒸汽消毒
參考GB15981-1995的要求實(shí)行。
附則G
（規(guī)范的附則）
培養(yǎng)液與具體制取
G1 營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液
成份：
蛋白胨 20g
牛肉膏 4g
氧化鈉 5G
瓊脂 15g-40g
純凈水 100mL
制作方法：除瓊脂外別的成份融解于純凈水中，調(diào)pH至7.2-7.4，添加瓊脂，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲(chǔ)備用。
G2 乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管
成份：
蛋白胨 40g
豬膽鹽（或牛、羊膽鹽） 5G
乳糖 20g
0.04%溴甲酚紫溶液 25mL
純凈水 加至100mL
制作方法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶解水里，校準(zhǔn)pH至7.4，添加顯色劑，散裝沒(méi)管五十米L，并放進(jìn)一個(gè)小倒管，115℃殺菌15min，即得。
G3 乳糖發(fā)醇管
成份：
蛋白胨 40g
乳糖 20g
0.04%溴甲酚紫溶液 25mL
純凈水 加至100mL
制作方法：將蛋白胨及乳糖溶解水里，校準(zhǔn)pH至7.4，添加顯色劑，散裝每管十米L，并放進(jìn)一個(gè)小倒管，115℃殺菌15min，即得。
G4 伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）
成份：
蛋白胨 20g
乳清蛋白 20g
磷酸氫二鉀 3g
瓊脂 17g
2%伊紅Y水溶液 50mL
0.65%美藍(lán)水溶液 十米L
純凈水 加至100mL
制作方法：將蛋白胨、聚磷酸鹽和瓊脂融解于純凈水中，校準(zhǔn)pH至7.1，散裝與蒸發(fā)皿內(nèi)，121℃殺菌15min預(yù)留，臨用時(shí)添加乳清蛋白并加溫融化瓊脂，冷至55℃，添加伊紅和美藍(lán)水溶液混勻，竭盡平板電腦。
G5 SCDLP 液體培養(yǎng)基
成份：
opo結(jié)構(gòu)脂胨 17 g
黃豆蛋白胨 3 g
氧化鈉 5 g
磷酸氫二鉀 2.5 g
葡萄糖 2.5 g
大豆卵磷脂 1 g
吐溫80 7 g
純凈水 1000 mL
制作方法：將各種各樣成份混和(如無(wú)opo結(jié)構(gòu)脂胨和黃豆蛋白胨能用日本多胨替代)，加溫融解，調(diào)pH至7.2～7.3，散裝，121℃殺菌20min，混勻，防止吐溫80沉到底端，冷至25℃后應(yīng)用。
G6 十六烷三羥基溴化銨培養(yǎng)液
成份：
牛肉膏 3 g
蛋白胨 10 g
氧化鈉 5 g
十六烷三羥基溴銨 0.3 g
瓊脂 20 g
純凈水 1000 mL
制法：除瓊脂外，以上各成份混和加溫融解，調(diào)pH至7.4～7.6，隨后添加瓊脂，115℃滅菌20 min，冷至55℃上下傾注平皿。
G7 綠膿菌素測(cè)量用培養(yǎng)液斜坡
成份：
蛋白胨 20 g
氧化鎂 1.4 g
硫酸銨 10 g
瓊脂 18 g
凡士林(化學(xué)純) 20g
純凈水 加至1 000 mL
制法：將蛋白胨、氧化鎂和硫酸銨加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加瓊脂和凡士林，加溫融解，散裝試管嬰兒，115℃滅菌20 min，做成斜坡預(yù)留。G8 果膠培養(yǎng)液
成份：
牛肉膏 3 g
蛋白胨 5 g
果膠 120 g
純凈水 1 000 mL
制作方法：各成份添加純凈水中泡浸20 min，加溫拌和融解，調(diào)pH至7.4，5 mL散裝試管嬰兒中，115℃ 殺菌20 min，站立做成高層住宅預(yù)留。
G9 磷酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)液
成份：
蛋白胨 10 g
酵母浸膏 3 g
硝酸鉀 2 g
亞硝酸鈉 0.5 g
純凈水 1000 mL
制作方法：將蛋白胨與酵母浸膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.2，燒開(kāi)過(guò)慮后補(bǔ)充水率，添加硝酸鉀和亞硝酸鈉融解勻稱(chēng)，散裝到有小倒管的試管嬰兒中，115℃殺菌20 min預(yù)留。
G10 血瓊脂培養(yǎng)液
成份：
營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂 100 mL
脫化學(xué)纖維羊血(或兔血) 10 mL
制作方法：將殺菌后的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂加溫融化，涼至55℃上下，用無(wú)菌檢測(cè)方式將10 mL脫化學(xué)纖維血添加后混勻，竭盡平皿置電冰箱預(yù)留。
G11 甘露醇發(fā)醇培養(yǎng)液
成份：
蛋白胨 10 g
牛肉膏 5 g
氧化鈉 5 g
甘露醇 10 g
0.2％溴麝香草酚藍(lán)水溶液 12 mL
純凈水 1000 mL
制作方法：將蛋白胨、氧化鈉、牛肉膏加到純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加甘露醇和溴麝香草酚藍(lán)攪拌后，散裝試管嬰兒，115℃殺菌20 min預(yù)留。
G12 葡萄糖水骨頭湯
成份：
蛋白胨 10 g
牛肉膏 5 g
氧化鈉 5 g
葡萄糖水 10 g
純凈水 1000 mL
制作方法：以上成份溶解純凈水中，調(diào)pH至7.2～7.4，加溫融解，散裝試管嬰兒，121℃殺菌15min儲(chǔ)備用。
G13 兔血液
制作方法：取殺菌3.8％三聚磷酸鈉1份，兔全血4份，攪拌靜放，3 000 r/min抽濾5 min，取上清，棄血球。
G14 沙氏瓊脂培養(yǎng)液
蛋白胨 10 g
葡萄糖水 40g
瓊脂 40g
純凈水 1000 mL
用700 mL純凈水將瓊脂融解，300 mL純凈水將葡萄糖水與蛋白胨融解，混和以上兩一部分，混勻后散裝，115℃殺菌15 min，即得。應(yīng)用前，用過(guò)慮殺菌方式添加0.1g/L的氯霉素或是0.03g/L的鏈霉素。
定性實(shí)驗(yàn)選用沙氏培養(yǎng)液，即除不用瓊脂外別的成份與制法跟上面一樣。
G15 營(yíng)養(yǎng)成分骨頭湯培養(yǎng)液
蛋白胨 10 g
氧化鈉 5 g
牛肉膏 3 g
純凈水 1000 mL
調(diào)整pH使殺菌后為7.2～7.4，散裝，115℃殺菌30 min，即得。
G16 溴甲酚紫葡萄糖水蛋白胨水培養(yǎng)液
蛋白胨 10 g
葡萄糖水 5G
純凈水 1000 mL
調(diào)整pH至7.0～7.2，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL，115℃ 殺菌30 min，即得。
G17 革蘭氏染色液
結(jié)晶紫上色液：
結(jié)晶紫 1 g
95％酒精 20 mL
1％草酸銨溶液 80 mL
將結(jié)晶紫融解于酒精中，隨后與草酸銨水溶液混和。
革蘭氏陽(yáng)性菌碘液：
結(jié)晶紫 1 g
碘 1 g
碘化鉀 2 g
純凈水 300 mL
脫色劑
95％酒精
復(fù)染色液：
(1)沙黃復(fù)染色液：
沙黃 0.25 g
95％酒精 10 mL
純凈水 90 mL
將沙黃融解于酒精中，隨后用純凈水稀釋液。
(2)稀石炭酸復(fù)紅液
稱(chēng)量偏堿復(fù)紅10g，研細(xì)，加95％酒精100ML，置放留宿，過(guò)濾紙過(guò)慮。取該液10mL，加5％石炭酸溶液90mL混和，即是石炭酸復(fù)紅液。再取此液10mL，加水90mL，即是稀石炭酸復(fù)紅液。
G18 0.03 mol/L聚磷酸鹽緩沖溶液（PBS，pH7.2）
成份：
磷酸氫二鈉 2.83 g
磷酸二氫鉀 1.36 g
純凈水 1000 mL
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