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微信公眾號(hào)：武漢得創(chuàng)凈化設(shè)備有限公司
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,
A．
3
物件表層微生物菌種環(huán)境污染查驗(yàn)方式
,
A．
3.1
取樣時(shí)間
,
潛在污染區(qū)、污染消毒殺菌后取樣。清潔區(qū)依據(jù)當(dāng)場狀況明確。
,
A．
3.2
取樣總面積
,
被采表層
<100 cm2
，取所有表層；被采表層≥
100 cm2
，取
100 cm
2
。
,
A．
3.3
取樣方式
,
用
5 cm
×
5 cm
殺菌規(guī)格型號(hào)板放到被檢物件表層，用浸有無菌檢測
0.03 mol
／
L
聚磷酸鹽緩沖溶液或鹽水取樣液的棉拭子
1
支，在規(guī)格型號(hào)板內(nèi)橫縱來回各擦抹
5
次，并隨著旋轉(zhuǎn)棉拭子，持續(xù)取樣
1
～
4
個(gè)規(guī)格型號(hào)板總面積，剪去手觸碰一部分，將棉拭子放進(jìn)配有
10 mL
取樣液的試管嬰兒中復(fù)檢。門拉手等中小型物件則選用棉拭子立即擦抹物件取樣。若取樣物件表層有消毒液殘余時(shí)，取樣液應(yīng)含相對(duì)還原劑。
,
A．
3.4
檢驗(yàn)方式
,
把取樣管充足震蕩后，取不一樣稀釋倍數(shù)的過柱液
1.0 mL
打疫苗平皿，將冷至
40
℃～
45
℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡
15 mL
～
20 mL
，
36
℃±
1
℃恒溫箱塑造
48 h
，記數(shù)菌體數(shù)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
,
A．
3.5
結(jié)果測算
[
如式
(A
．
2)]
,
,
A.4 醫(yī)護(hù)人員手衛(wèi)生查驗(yàn)方式
,
A.4.1 取樣時(shí)間
,
采用手衛(wèi)生后，在觸碰患者或從業(yè)診療主題活動(dòng)前取樣。
,
A.4.2 取樣方式
,
將浸有無菌檢測
0.03 mol
／
L
聚磷酸鹽緩沖溶液或鹽水取樣液的棉拭子一支在兩手指斜面從指跟得指端往返涂擦各2次（一只手涂擦總面積約
30 cm
2
），并隨著旋轉(zhuǎn)取樣棉拭子，剪去手觸碰位置，將棉拭子放進(jìn)配有
10 mL
取樣液的試管嬰兒內(nèi)復(fù)檢。取樣總面積按立方厘米
(cm
2
)
測算。若取樣時(shí)手里有消毒液殘余，取樣液應(yīng)含相對(duì)還原劑。
,
A.4.3 檢驗(yàn)方式
,
把取樣管充足震蕩后，取不一樣稀釋倍數(shù)的過柱液
1
．
O mL
打疫苗平皿，將冷至
40
℃～
45
℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡
15 mL
～
20 mL
，
36
℃±
1
℃恒溫箱塑造
48 h
，記數(shù)菌體數(shù)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
,
A．
4.4
結(jié)果測算
[
如式
(A
．
3)]
,
,
A．
5
醫(yī)療器械查驗(yàn)方式
,
A．
5.1
取樣時(shí)間
,
在消毒殺菌或殺菌解決后，儲(chǔ)放有效期限內(nèi)取樣。
,
A.5.2 殺菌醫(yī)療器械的查驗(yàn)方式
,
A．
5.2.1
能用毀滅性方式抽樣的，如一次性打點(diǎn)滴（血）器、注射針和注射器等依照《中華人民共和國藥典》中“無菌檢測檢測法”開展。對(duì)不能用毀滅性方式抽樣的醫(yī)療器械，應(yīng)在自然環(huán)境潔凈度等級(jí)
10 000
級(jí)下的部分潔凈度等級(jí)
100
級(jí)的單邊流氣體地區(qū)內(nèi)或防護(hù)系統(tǒng)軟件中，用浸有無菌檢測鹽水取樣液的棉拭子在被檢物件表層擦抹，取樣取所有表層或不少于
100 cm
2
；隨后將去除手觸碰一部分的棉拭子開展無菌檢測查驗(yàn)。
,
A．
5.2.2
牙科手機(jī)：應(yīng)在自然環(huán)境潔凈度等級(jí)
10 000
級(jí)下的部分潔凈度等級(jí)
100
級(jí)的單邊流氣體地區(qū)內(nèi)或防護(hù)系統(tǒng)軟件中，將每一個(gè)手機(jī)上各自放置含
20 mL
～
25 mL
取樣液的無菌檢測大試管嬰兒
(
內(nèi)徑
25 mm)
中，液位高寬比應(yīng)超過
4.0 cm
，于旋渦混合器上清洗波動(dòng)
30 s
之上，取過柱液開展無菌檢測查驗(yàn)。
,
A.5.3 消毒殺菌醫(yī)療器械的查驗(yàn)方式
,
A．
5.3.1
可整個(gè)放進(jìn)無菌檢測試管嬰兒的，用過柱液浸入后波動(dòng)
30 s
之上，取過柱液
1
．
O mL
打疫苗平皿，將冷至
40
℃～
45
℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡
15 mL
～
20 mL
，
36
℃±
1
℃恒溫箱塑造
48 h
，記數(shù)菌體數(shù)
(CFU/
件
)
，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
,
A．
5.3.2
能用毀滅性方式抽樣的，在
100
級(jí)凈化工作臺(tái)稱量
1 g
―
lo g
試品，放進(jìn)配有
10 mL
取樣液的試管嬰兒內(nèi)開展過柱，取過柱液
1
．
O mL
打疫苗平皿，記數(shù)菌體數(shù)
(CFU/g)
，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。對(duì)不能用毀滅性方式抽樣的醫(yī)療器械，在
100
級(jí)凈化工作臺(tái)，用浸有無菌檢測鹽水采樣液的棉拭子在被檢物件表面擦抹采樣，被采表面
<100 cm
2
，取所有表面，被采表面≥
100 cm
2
，取
100 cm
2
，隨后將去除手觸碰一部分的棉拭子開展過柱，取過柱液
1
．0
mL
打疫苗平皿，將冷至
40
℃～
45
℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡
15 mL
～
20 mL
，
36
℃±
1
℃恒溫箱塑造
48 h
，記數(shù)菌體數(shù)
(CFU/cm
2
)
，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
,
A．
5.3.3
消毒殺菌后內(nèi)窺鏡：取清理消毒殺菌后內(nèi)窺鏡，選用無菌檢測注射針提取
50 mL
含相對(duì)還原劑的過柱液，從穿刺活檢口引入清洗內(nèi)窺鏡管道，并全量搜集（可應(yīng)用隔膜泵）復(fù)檢。將過柱液充足攪拌，取過柱液
1.0 mL
打疫苗平皿，將冷至
40
℃～
45
℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡
15 mL
～
20 mL
，
36
℃±
1
℃恒溫箱塑造
48 h
，記數(shù)菌體數(shù)
(CFU/
件
)
。將剩下過柱液在無菌檢測標(biāo)準(zhǔn)下選用濾紙
(0. 45
μ
m)
過慮濃縮，將濾紙打疫苗于凝結(jié)的營養(yǎng)成分瓊脂平板電腦上（留意不必造成汽泡），置
36
℃±
1
℃溫箱塑造
48 h
，記數(shù)菌體數(shù)。
,
當(dāng)濾膜法不計(jì)其數(shù)時(shí)：
,
菌落總數(shù)（
CFU/
件）
=m(CFU/
平板電腦
)
×
50
……
(A
．
4)
,
式中：
,
m-兩平行面平板電腦的均值菌體數(shù)。
,
當(dāng)濾膜法可計(jì)數(shù)時(shí)：
,
菌落總數(shù)（
CFU/
件）
=m(CFU/
平板電腦
) mf
（
CFU/
濾紙） …………
(A
．
5)
,
式中：
,
m-兩平行面平板電腦的均值菌體數(shù)；
,
mf -濾紙上菌體數(shù)。
,
A.6 消毒液查驗(yàn)方式
,
A.6.1 消毒液取樣
,
取樣分庫存量消毒液和應(yīng)用中消毒劑。
,
A．
6.2
消毒液成分成分查驗(yàn)方式
,
庫存量消毒液的成分成分應(yīng)按照《消毒技術(shù)規(guī)范》或商品產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)開展檢驗(yàn)；應(yīng)用中消毒劑的合理濃度值測量能用上述情況方式，也可應(yīng)用經(jīng)國衛(wèi)行政機(jī)關(guān)準(zhǔn)許的消毒液濃度值測紙（卡）開展檢測。
,
A．
6.3
應(yīng)用中消毒劑染菌量查驗(yàn)方式
,
A．
6.3.1
用無菌檢測塑料吸管按無菌操作原則方式汲取
1.0 mL
被檢消毒劑，添加
9 mL
還原劑中攪拌。醛類與酚類消毒劑用一般營養(yǎng)成分骨頭湯中合，含氯消毒劑、含碘消毒液和氯丁二烯消毒液用含
0.1%
硫代硫酸鈉還原劑，洗必泰、季銨鹽類消毒液用含
0.3%
吐溫
80
和0.3
%
大豆卵磷脂還原劑，代烴消毒液用含
0.3%
甘氨酸中和劑，帶有表活劑的各種各樣棘籽消毒劑可在中和劑中添加吐溫
80
至
3%;
也可應(yīng)用該消毒劑消毒殺菌實(shí)際效果檢驗(yàn)的中和劑評(píng)定實(shí)驗(yàn)明確的中和劑。
,
A．
6.3.2
用無菌檢測塑料吸管汲取一定稀釋液占比的中合后溶液
1.0 mL
打疫苗平皿，將冷至
40
℃～
45
℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡
15 mL
～
20 mL
，
36
℃±
1
℃恒溫箱塑造
72 h
，記數(shù)菌體數(shù)；必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。,
消毒劑染菌量
(CFU
／
mL)=
均值每皿菌體數(shù)×
10
×稀釋倍數(shù) …………
(A
．
6),
A．
7
醫(yī)治自來水查驗(yàn)方式
,
血透有關(guān)醫(yī)治自來水按
YY 0572
開展檢驗(yàn)。別的醫(yī)治自來水依照有關(guān)規(guī)范實(shí)行。
,
A．
8
紫外線滅菌燈查驗(yàn)方式
,
A．
8.1
紫外線滅菌燈取樣
,
取樣分庫存量紫外線滅菌燈和應(yīng)用中紫外線滅菌燈。
,
A．
8.2
庫存量（新開啟）紫外線滅菌燈輻射源光照強(qiáng)度值查驗(yàn)方式
,
依照
GB 19258
開展。
,
A．
8.3
應(yīng)用中紫外線滅菌燈輻射源光照強(qiáng)度值查驗(yàn)方式
,
A．
8.3.1
儀器設(shè)備法。打開紫外線滅菌燈
5 min
后，將測量光波長為
253.7 nm
的紫外光輻照度計(jì)攝像頭放置被檢紫外線滅菌燈下安全距離
1米
的中間處，待儀表平穩(wěn)后，所示數(shù)據(jù)信息即是該紫外線燈的輻射源照度值。
,
A．
8.3.2
標(biāo)示卡法。打開紫外線燈
5 min
后，將標(biāo)示卡置紫外線殺菌燈下安全距離
1米
處，有圖案設(shè)計(jì)一面朝上，直射
1 min
，觀查標(biāo)示卡圖形的色調(diào)，將其與規(guī)范圖形較為。
,
A．
8.4
常見問題
,
紫外光輻照度計(jì)應(yīng)在計(jì)量檢定單位計(jì)量檢定的有效期限內(nèi)應(yīng)用；紫外光檢測標(biāo)示卡應(yīng)獲得國衛(wèi)行政機(jī)關(guān)的批準(zhǔn)批文，并在商品有效期限內(nèi)應(yīng)用。
,
A．
9
消毒器械查驗(yàn)方式
,
A．
9.1
除菌因素抗壓強(qiáng)度測量：按《消毒技術(shù)規(guī)范》或公司標(biāo)準(zhǔn)的方式開展檢驗(yàn)。
,
A．
9.2
辦公環(huán)境有害物質(zhì)濃度值（抗壓強(qiáng)度）測量：按《消毒技術(shù)規(guī)范》或有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的方式開展檢驗(yàn)。
,
A．
10
醫(yī)院污水查驗(yàn)方式
,
按
GB 18466
要求開展檢驗(yàn)。
,
A. 11 疫點(diǎn)（區(qū)）消毒殺菌實(shí)際效果檢驗(yàn)方式
,
按
GB 19193
要求開展檢驗(yàn)。
,
A．
12
大腸桿菌查驗(yàn)方式
,
依照
GB 4789.3
開展檢驗(yàn)。
,
A．
13
沙門茵查驗(yàn)方式
,
依照
GB 4789.4
開展檢驗(yàn)。
,
A. 14 乙型肝炎血溶鏈球菌感染查驗(yàn)方式
,
依照
GB/T 4789.11
開展檢驗(yàn)。
,
A．
15
銅綠假單胞菌查驗(yàn)方式
,
依照
GB 7918.4
開展檢驗(yàn)。
,
A．
16
橙黃色鏈球菌查驗(yàn)方式
,
依照
GB 7918.5
開展檢驗(yàn)。
,
A．
17
別的總體目標(biāo)微生物菌種查驗(yàn)方式
,
依照有關(guān)檢驗(yàn)方式開展。
,
（規(guī)范化附則）
,
實(shí)驗(yàn)試劑和培養(yǎng)液
,
B．
1 0.03 moI/L
聚磷酸鹽緩沖溶液
(0.03 moI/L PBS)
,
稱量磷酸氫二鈉
2.84 g
，磷酸二氫鉀
1.36 g
，添加到
1000 mL
純凈水中，待徹底融解后，調(diào)
pH
至
7. 2
～
7.4
，于
121
℃工作壓力蒸氣殺菌
20 min
。
,
B．
2
過柱液
,
稱量蛋白胨
10. 00 g
，氧化鈉
8.50 g
，吐溫
-80 1.0ML
，添加到
1 000 mL 0.03mol/L
聚磷酸鹽緩沖溶液中，加溫融解后調(diào)
pH
至
7.2
～
7.4
，于
121
℃工作壓力蒸氣殺菌
20 min
。
,
B．
3
鹽水
,
稱取氯化鈉
8. 50 g
，融解于
1000 mL
純凈水中，于
121
℃工作壓力蒸氣殺菌
20 min
。
,
B．
4
革蘭氏染色液及上色方式
,
B.4.1 結(jié)晶紫上色液：稱取結(jié)晶紫
1.00 g
，融解于
20 mL 95%
乙醇中，隨后與
80 mL 1%
草酸銨溶液混和。
,
B．
4.2
革蘭碘液：稱取碘
1. 00 g
，碘化鉀
2.00 g
，混和后添加純凈水少量，充足振搖，待徹底融解后，再加純凈水至
300 mL
，攪拌。
,
B．
4.3
沙黃復(fù)染色液：稱取沙黃
0. 25 g
，融解于
10 mL 95%
酒精溶液中，隨后添加
90 mL
純凈水，攪拌。
,
B．
4.4
上色方式以下：
,
a)將玻片在火苗上固定不動(dòng)。
,
b)滴入結(jié)晶紫上色液，功效
1 min
，水清洗。
,
c) 滴加革蘭碘液，功效
1min
，水清洗。
,
d)乙醇褪色
30 s
；或?qū)⒁掖嫉螡M全部玻片，馬上傾去，再用乙醇滴滿全部玻片，褪色
10 s
。
,
e)水清洗，滴沙黃復(fù)染色液，功效
1 min
，水清洗。
,
f) 待干鏡檢查。
,
B．
5
人（兔）血漿
,
取殺菌
3.8%
三聚磷酸鈉
1
份，加微信好友（兔）全血
4
份，攪拌靜放，
3 000 r
／
min
抽濾
5 min
，取上清，棄血球。
,
B．
6
一般營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液
,
B．
6.1
成份：蛋白胨
10 g
、牛肉膏
5G
、氧化鈉
5G
、瓊脂
15 g
、純凈水
1000 mL
。
,
B．
6.2
做法：除瓊脂外別的成份融解于純凈水中，調(diào)
pH
至
7.2
～
7.4
，添加瓊脂，加溫融解，散裝于
121
℃工作壓力蒸氣殺菌
20 min
。
,
B．
7
血瓊脂培養(yǎng)液
,
B．
7.1
成份：營養(yǎng)成分瓊脂
100 mL
、脫化學(xué)纖維羊血（或兔血）
10 mL
。
,
B．
7.2
做法：將營養(yǎng)成分瓊脂加溫熔融待冷至
50
℃上下，以無菌操作原則將
10 mL
脫化學(xué)纖維血添加后混勻，竭盡平皿，置電冰箱預(yù)留。,
B．
8
需
-
綠膿桿菌培養(yǎng)液
,
B．
8.1
成份：酪胨（胰酶水解反應(yīng)）
15 g
、牛肉膏
4g
、葡萄糖
5G
、氯化鈉
2.5 g
、
L-
胱氨酸
0.5 g
、硫酒精酸鈉緩釋片
0.5 g
、酵母菌浸取粉
5 g
、新鮮配置的
0.1%
刃天青水溶液
1
．
o mL
或新配置的
0.2%
亞甲藍(lán)水溶液
0.5 mL
、瓊脂
0.5 g
～
0. 7g
、純凈水
1 000 mL
。
,
B．
8.2
做法：除葡萄糖和刃天青水溶液外，取以上成份添加純凈水中，微溫融解后，調(diào)
pH
至弱堿性，燒開、濾清，添加葡萄糖和刃天青水溶液，混勻，調(diào)
pH
至
6.9
～
7.3
，散裝后
115
℃工作壓力蒸氣殺菌
30 min
。
,
B．
9 SCDLP
液體培養(yǎng)基
,
B．
9.1
成份：opo結(jié)構(gòu)脂胨
17 g
、黃豆蛋白胨
4g
、葡萄糖
2.5 g
、氯化鈉
5G
、磷酸氫二鉀
2.5 g
、大豆卵磷脂
lg
、吐溫
-80 7g
、純凈水
1 000 mL
。
,
B．
9.2
做法：將各種各樣成份混和（如無opo結(jié)構(gòu)脂胨和黃豆蛋白胨能用日本多胨替代），加溫融解后，調(diào)
pH
至
7.2
～
7.3
，分裝于
121
℃工作壓力蒸汽滅菌
20 min
，混勻，冷至
25
℃應(yīng)用。
,
B．
10
伊紅美藍(lán)培養(yǎng)液
,
B．
10.1
成份：蛋白胨
10 g
、乳清蛋白
10 g
、磷酸二氫鉀
3g
、
2%
伊紅水溶液
2 mL
、
0.65%
美藍(lán)水溶液
1 mL
、瓊脂
17 g
、純凈水
1000 mL
。
,
B．
10.2
做法：將蛋白胨、聚磷酸鹽和瓊脂融解于純凈水中，調(diào)
pH
至
7.1
，分裝后
121
℃工作壓力蒸汽滅菌
20 min
。臨用時(shí)，以無菌操作原則添加乳清蛋白并加溫融化瓊脂，冷至
50
℃時(shí)，添加伊紅和美藍(lán)水溶液混勻，竭盡平皿，置
4
℃電冰箱預(yù)留。
,
B．
11 0.5%
葡萄糖水骨頭湯培養(yǎng)液
,
B．
11.1
成份：胨
10 g
、氧化鈉
5G
、葡萄糖水
5G
、肉浸液
1000 mL
。
,
B．
11.2
做法：取胨與氧化鈉添加肉浸液內(nèi)，微溫融解后，調(diào)
pH
至弱堿性，燒開，添加葡萄糖水融解后，混勻，濾清，調(diào)
pH
至
7.0
～
7.4
，分裝，于
115
℃壓力蒸汽滅菌
30 min
。
,
B．
12
甘露醇培養(yǎng)液
,
B．
12.1
成份：蛋白胨
10 g
、牛肉膏
5G
、氧化鈉
5G
、甘露醇
10 g
、
0.2%
溴麝香草酚藍(lán)水溶液
12 mL
、純凈水
1 000 mL
。
,
B．
12.2
將蛋白胨、氧化鈉、牛肉膏添加純凈水中，加溫融解，調(diào)
pH
至
7.4
，添加甘露醇和溴麝香草酚
藍(lán)攪拌后，散裝，于115
℃
壓力蒸汽滅菌20 min
。
,
B
．
13
乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管
GB 15982-2012,
B
．
13.1
成份：蛋白胨
20 g
、豬膽鹽（或牛，羊膽鹽）
5G
、乳清蛋白
10 g
、
0.04%
溴甲酚紫溶液
25 mL
、純凈水
1 000ML
。
,
B
．
13.2
做法：將蛋白胨、膽鹽及乳清蛋白融解于純凈水中，調(diào)
pH
至
7.4
，添加
0.04%
溴甲酚紫溶液，散裝
(
每管
10 mL)
，并放入一個(gè)發(fā)醇管，于
115
℃
工作壓力蒸汽滅菌15 min
。
,
B
．
14
乳清蛋白發(fā)醇管
,
B
．
14.1
成份：蛋白胨
20 g
、乳清蛋白
10 g
、
0.04%
溴甲酚紫溶液
25mL
、純凈水
1 000 mL
。
,
B
．
14.2
做法：將蛋白胨及乳清蛋白融解于純凈水中，調(diào)
pH
至
7.4
，添加
0.04%
溴甲酚紫溶液，散裝
(
每管
10 mL)
，并放入一個(gè)發(fā)醇管，于
115
℃
工作壓力蒸汽滅菌15 min
。
,
B
．
15
溴甲酚紫葡萄糖水蛋白胨水培養(yǎng)液
,
B
．
15.1
成份：蛋白胨
10 g
、葡萄糖水
5G
、
2%
溴甲酚紫酒精溶液
0.6 mL
、純凈水
1000 mL
。
,
B
．
15.2
做法：將蛋白胨、葡萄糖水融解于純凈水中，調(diào)
pH
至
7
．
O
～
7.2
，添加
2%
溴甲酚紫酒精溶液，搖勻后，分裝
(
每管
5 mL)
，并放進(jìn)一個(gè)發(fā)醇管，于
115
℃
工作壓力蒸氣殺菌30 min
，置
4
℃
電冰箱預(yù)留。
,
B
．
16
綠膿菌素測量用培養(yǎng)液
,
B
．
16.1
胨
20 g
、氧化鎂（沒有水）
1.4 g
、硫酸銨
10 g
、凡士林
10 mL
、瓊脂
18 g
～
20 g
、純凈水
1 000 mL
。
,
B
．
16.2
做法：取胨、氧化鎂、硫酸銨添加水里，微溫使融解，調(diào)整
pH
使殺菌后為
7.2
～
7.4
，分裝于小試管嬰兒，殺菌。
,
B
．
17
果膠培養(yǎng)液
,
B
．
17.1
胨
5 g
、果膠
120 g
、牛羊肉浸取粉
4g
、純凈水
1 000 mL
。
,
B
．
17.2
取以上各成分添加水里，浸泡約
20 min
，隨時(shí)隨地拌和，加溫使融解，調(diào)整
pH
值使殺菌后為
7.2
～
7.4
，散裝于小試管嬰兒，殺菌。
,
B
．
18
常見問題
,
B
．
18.1
三料乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管除純凈水外，別的成分為乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管的
2
倍；
3
倍濃縮乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管除純凈水外，別的成分為乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管的
3
倍。
,
B
．
18.2
培養(yǎng)液用的試管嬰兒口和三角燒瓶口運(yùn)用棉塞或硅橡膠做成的瓶塞，再用包裝紙包好。
,
B
．
18.3
實(shí)驗(yàn)試劑與培養(yǎng)液配置好后應(yīng)置清理處儲(chǔ)存，常溫狀態(tài)不超過
1
個(gè)月。培養(yǎng)液強(qiáng)烈推薦
4
℃
冷凍儲(chǔ)存。,
醫(yī)院消毒環(huán)境衛(wèi)生規(guī)范
Hygienic standard for disinfection in hospitals
我國國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
GB 15982-2012 替代 GB 15982-1995
2012-06-29公布 2012-11-01實(shí)施
本規(guī)范的所有技術(shù)性內(nèi)容為強(qiáng)制。
本規(guī)范替代GB 15982-1995《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》。本規(guī)范與GB 15982-1995較為，關(guān)鍵轉(zhuǎn)變以下：
――改動(dòng)了規(guī)范的應(yīng)用領(lǐng)域（見第1章，1995年版的第1章）；
――改動(dòng)了規(guī)范化引入文檔（見第2章，1995年版的第2章）；
――改動(dòng)了專業(yè)術(shù)語，提升了二類醫(yī)療器械，醫(yī)療器械和高寬比、輕中度、輕度危險(xiǎn)因素器械，殺菌和高質(zhì)量、中水準(zhǔn)、適度性消毒殺菌，多重耐藥菌的界定（見第3章，1995年版的第3章）；
――改動(dòng)了各種環(huán)境質(zhì)量、物件表層、醫(yī)務(wù)人員手質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（見4.1和4.2，1995年版的4.1）；
――改動(dòng)了醫(yī)用品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（見4.3，1995年版的4.2）；
――改動(dòng)了應(yīng)用中消毒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（見4.6，1995年版的4.3）；
――刪除了無菌檢測器材儲(chǔ)存液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（見1995年版的4.3.2）；
――提升了醫(yī)治自來水、防護(hù)裝備、消毒液和消毒器械、疫點(diǎn)（區(qū)）消毒殺菌的衛(wèi)生要求（見4.4、4.5、4.6、4.7和4.9）；
――改動(dòng)了廢棄物解決質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和工業(yè)廢水規(guī)范（見4.8，1995年版的4.4和4.5）；
――提升了醫(yī)院消毒管理方法規(guī)定（見第5章）；
――改動(dòng)了原附則A“取樣及查驗(yàn)方式”（見附則A，1995年版的附則A）；
――改動(dòng)了氣體取樣及查驗(yàn)方式（見A．2，1995年版的A.1）；
――改動(dòng)了醫(yī)用品取樣及查驗(yàn)方式（見A.5，1995年版的A．5）；
――提升了醫(yī)治自來水、紫外線滅菌燈、消毒器械、醫(yī)院污水查驗(yàn)方式、疫點(diǎn)（區(qū)）消毒殺菌實(shí)際效果檢驗(yàn)方式和腸子
有益菌查驗(yàn)方式(見A．7、A．8、A．9、A. 1o、A．11、A．12)；
――刪除了原附則B“本規(guī)范措辭表明”(見1995年版的附錄B)；
――提升了新附錄B“實(shí)驗(yàn)試劑和培養(yǎng)液”(見附錄B)。
本規(guī)范由我國國家衛(wèi)生部明確提出并歸口。
本規(guī)范擬定企業(yè)：浙江疾病防治監(jiān)測中心、北京疾病防治監(jiān)測中心、我國疾病防治監(jiān)測中心、北京大學(xué)第一醫(yī)院、北京市長江脈藥業(yè)高新科技有限責(zé)任公司、杭州市朗索醫(yī)用消毒劑有限責(zé)任公司、上海利康消毒殺菌新科技有限責(zé)任公司、強(qiáng)生公司（上海市）醫(yī)療器械有限責(zé)任公司、上海市九譽(yù)生物科技公司有限責(zé)任公司、北京市自主創(chuàng)新新世紀(jì)生物化學(xué)智能科技有限責(zé)任公司、國家衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督所管理中心、上海疾病防治監(jiān)測中心、江蘇疾病防治監(jiān)測中心、武漢疾病防治監(jiān)測中心、福建疾病防治監(jiān)測中心、浙江省興昌離心風(fēng)機(jī)有限責(zé)任公司。
本規(guī)范關(guān)鍵起草人：胡國慶、鄧小虹、張流波、李六億、喬宏、戴彥臻、孫建生、卞梅瑰、谷京宇、沈偉、徐燕、梁建生、林云旺、陳楚暉、任銀萍、劉俊、張一鳴。
本規(guī)范所替代規(guī)范的歷年來版本號(hào)公布狀況為：
――GB15982-1995
本標(biāo)準(zhǔn)了醫(yī)院消毒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、醫(yī)院消毒管理方法規(guī)定及其查驗(yàn)方式。
本規(guī)范適用各個(gè)各種定點(diǎn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)。各個(gè)疾病防治操縱組織 和采供血組織 依照實(shí)行。
以下文檔針對(duì)本規(guī)范的運(yùn)用是不可或缺的。但凡注日期的引入文檔，僅注日期的版本號(hào)適用本文檔。但凡不注日期的引入文檔，其最新版（包含全部的改動(dòng)單）適用本文檔。
GB 4789.3 食品類分子生物學(xué)檢測 大腸桿菌記數(shù)
GB 4789.4 食品類分子生物學(xué)檢測沙門菌檢測
GB/T 4789.11 食品衛(wèi)生安全分子生物學(xué)檢測血溶鏈球菌感染檢測
GB 5749 生活用水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
GB 7918.4 護(hù)膚品微生物菌種規(guī)范檢測方式綠膿桿菌
GB 7918.5 護(hù)膚品微生物菌種規(guī)范檢測方式橙黃色鏈球菌
GB 18466 定點(diǎn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)水空氣污染物環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)
GB 19082 醫(yī)療一次性防護(hù)衣技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)
GB 19083 醫(yī)療防塵口罩技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)
GB 19193 疫源地消毒殺菌通則
GB 19258 紫外線消毒燈
GB 50333 醫(yī)院門診清潔手術(shù)室工程建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)
WS 310.1 醫(yī)院消毒供貨管理中心第1一部分：管理制度
WS 310.2 醫(yī)院消毒供貨管理中心第2一部分：清理消毒殺菌及殺菌技術(shù)性操作規(guī)范
WS 310.3 醫(yī)院消毒供貨管理中心第3一部分：清理消毒殺菌及殺菌實(shí)際效果檢測規(guī)范
WS/T 311 醫(yī)院隔離技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)
WS/T 313 醫(yī)護(hù)人員手衛(wèi)生規(guī)范
YY 0469 醫(yī)療外科口罩技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)
YY 0572 血透和有關(guān)醫(yī)治自來水
消毒殺菌技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)國家衛(wèi)生部
醫(yī)院門診廢水處理技術(shù)性手冊 中華人民共和國財(cái)政部
我國中國藥典國家衛(wèi)生部
醫(yī)療服務(wù)組織 醫(yī)療廢棄物管理?xiàng)l例國家衛(wèi)生部
以下專業(yè)術(shù)語和界定適用本文檔。
3.1
二類醫(yī)療器械 disinfection product
列入國家衛(wèi)生部《消毒產(chǎn)品分類目錄》，用以醫(yī)院消毒的消毒液、消毒器械和日用品。
3.2 醫(yī)療器械 medical device／health care product
用以確診、醫(yī)治、醫(yī)護(hù)、適用、取代的器材、器材和物件的統(tǒng)稱。依據(jù)應(yīng)用中導(dǎo)致感柒的風(fēng)險(xiǎn)水平，分高寬比危險(xiǎn)因素醫(yī)療器械、輕中度危險(xiǎn)因素醫(yī)療器械和輕度危險(xiǎn)因素醫(yī)療器械。
3.2.1高寬比危險(xiǎn)因素醫(yī)療器械 critical device/items
進(jìn)到一切正常無菌檢測機(jī)構(gòu)、脈管系統(tǒng)或有無菌檢測血液（如血夜）穿過，一旦被微生物菌種環(huán)境污染將造成 極高感柒風(fēng)險(xiǎn)的器械。
3.2.2中度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材 semi-critical device／items
立即或間接接觸粘膜的器械。
3.2.3輕度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材 no-critical device/items
僅與詳細(xì)肌膚觸碰而不與粘膜觸碰的器械。
3.3
殺菌 sterilization
消滅或消除醫(yī)療器材上一切微生物菌種的解決。殺菌的無菌檢測確保水準(zhǔn)應(yīng)做到10-6。
3.4
高質(zhì)量消毒殺菌 high-level disinfection
消滅各種各樣細(xì)菌繁殖體、病毒感染、細(xì)菌以及胞子和絕大部分細(xì)菌芽孢的消毒殺菌解決。
3.5
中水準(zhǔn)消毒殺菌 intermediate-level disinfection
消滅除細(xì)菌芽孢之外的各種各樣微生物的消毒殺菌解決。
3.6
適度性消毒殺菌 low-level disinfection
僅能消滅細(xì)菌繁殖體（分枝桿菌以外）和親脂病毒感染的消毒殺菌解決。
3.7多重耐藥菌 multidrug-resistant organism; MDRO
對(duì)臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用的三類或三類之上抗菌藥另外展現(xiàn)抗藥性的病菌。普遍多重耐藥菌包含耐甲氧西林橙黃色鏈球菌(MRSA)、耐萬古霉素腸球菌(VRE)、產(chǎn)超廣譜性β一內(nèi)酰胺酶(ESBLs)病菌、耐碳青霉烯類抗菌藥腸桿菌科病菌(CRE)（如產(chǎn)I型墨西哥城金屬材料β內(nèi)酰胺酶[NDM-1]或產(chǎn)碳青霉烯酶[KPC]的腸桿菌科病菌）、耐碳青霉烯類抗菌藥鮑曼不動(dòng)桿菌( CR-AB)、多重耐藥／泛抗藥性銅綠假單胞菌(MDR/PDR-PA)和多重耐藥結(jié)核分枝桿菌等。
4.1 各種環(huán)境質(zhì)量、物件表層
4.1.1 菌落總數(shù)應(yīng)合乎表1規(guī)定。
I類自然環(huán)境為選用氣體清潔技術(shù)性的診治場地，分清潔手術(shù)室和別的清潔場地。Ⅱ類自然環(huán)境為非清潔手術(shù)室（室）；待產(chǎn)室；導(dǎo)管室；血液疾病病房、燙傷病房等保護(hù)性隔離病房；重癥監(jiān)護(hù)室病房；新生嬰兒室等。Ⅲ類自然環(huán)境為母嬰用品同室；消毒殺菌供貨管理中心的查驗(yàn)包裝殺菌區(qū)和無菌檢測物件儲(chǔ)放區(qū)；血透管理中心（室）；別的一般住院治療病房等。Ⅳ類自然環(huán)境為一般門（急）診以及查驗(yàn)、診斷室；傳染性疾病科醫(yī)院門診和病房。
表1 各種環(huán)境質(zhì)量、物件表層菌落總數(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
| 環(huán)境類別 |
氣體均值菌體數(shù)a |
物件表層均值菌體數(shù)CFU/cm2 |
||
| CFU／皿 |
CFU/m3 |
|||
| I類自然環(huán)境 |
清潔手術(shù)室 |
合乎GB 50333規(guī)定 |
≤150 |
≤5．0 |
| 別的清潔場地 |
≤4. 0(30 min)b |
|||
| Ⅱ類環(huán)境 |
≤4. 0(15 min) |
-- |
≤5．0 |
|
| Ⅲ類環(huán)境 |
≤4. 0(5 min) |
-- |
≤10．0 |
|
| Ⅳ類環(huán)境 |
≤4.0(5 min) |
-- |
≤10．0 |
|
| a CFU／皿為平板電腦曝露法，CFU/m3為空氣采樣器法。 b 平板電腦曝露法檢驗(yàn)時(shí)的平板電腦曝露時(shí)間。 |
||||
4.1.2猜疑院內(nèi)感染爆發(fā)或疑是爆發(fā)與醫(yī)院門診環(huán)境相關(guān)時(shí)，應(yīng)開展總體目標(biāo)微生物檢驗(yàn)。
4.2 醫(yī)護(hù)人員手
4.2.1 衛(wèi)生手消毒后醫(yī)護(hù)人員手表層的菌落總數(shù)應(yīng)≤10 CFU/cm2。
4.2.2 外科手消毒后醫(yī)護(hù)人員手表層的菌落總數(shù)應(yīng)≤5 CFU/cm2。
4.3 醫(yī)療器械
4. 3.1 高寬比危險(xiǎn)因素醫(yī)療器械應(yīng)無菌檢測。
4.3.2 中度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材的菌落總數(shù)應(yīng)≤20 CFU/件（CFU/g或CFU／100 cm2），不可驗(yàn)出高致病微生物菌種。
4.3.3 輕度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材的菌落總數(shù)應(yīng)≤200 CFU/件(CFU/g或CFU／100 cm2)，不可驗(yàn)出高致病微生物菌種。
4.4醫(yī)治自來水
血透有關(guān)醫(yī)治自來水應(yīng)合乎YY 0572規(guī)定；別的醫(yī)治自來水應(yīng)合乎相對(duì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
4.5 防護(hù)裝備
醫(yī)療防塵口罩、外科口罩和一次性防護(hù)衣等防護(hù)裝備應(yīng)合乎GB 19083、YY 0469和GB 19082
規(guī)定。
4.6消毒液
4.6.1 滅菌劑、皮膚黏膜消毒液應(yīng)應(yīng)用合乎《中華人民共和國藥典》的純水系統(tǒng)或無菌水配置，別的消毒液的配置自來水應(yīng)合乎GB 5749規(guī)定。
4.6.2應(yīng)用中消毒劑的合理濃度值應(yīng)合乎應(yīng)用規(guī)定；持續(xù)應(yīng)用的消毒劑每日應(yīng)用前要開展合理濃度值的檢測。
4.6.3殺菌用消毒劑的菌落總數(shù)應(yīng)是0 CFU／mL；皮膚黏膜消毒劑的菌落總數(shù)應(yīng)合乎相對(duì)規(guī)范規(guī)定；別的應(yīng)用中消毒劑的菌落總數(shù)應(yīng)≤100 CFU／mL，不可驗(yàn)出高致病微生物菌種。
4.7消毒器械
4.7.1應(yīng)用中消毒器械的除菌因素抗壓強(qiáng)度應(yīng)合乎應(yīng)用規(guī)定。紫外線滅菌燈應(yīng)合乎GB 19258規(guī)定，應(yīng)用中紫外線滅菌燈(30 W)的輻射源光照強(qiáng)度值應(yīng)≥70 uW/cm2。
4.7.2辦公環(huán)境中消毒器械造成的有害物質(zhì)濃度值（抗壓強(qiáng)度）應(yīng)合乎有關(guān)要求。造成活性氧的消毒器械的辦公環(huán)境的二氧化碳濃度應(yīng)<0.16 mg／m3。環(huán)氧乙烷蒸汽滅菌器辦公環(huán)境的環(huán)氧乙烷濃度值應(yīng)<2 mg／m3。
4.8廢水處理
工業(yè)廢水應(yīng)合乎GB 18466規(guī)定。
4.9疫點(diǎn)（區(qū)）消毒殺菌
消毒殺菌實(shí)際效果應(yīng)合乎GB 19193規(guī)定。
5.1 工程建筑合理布局和消毒隔離設(shè)備
5.1.1建筑規(guī)劃設(shè)計(jì)和工作內(nèi)容應(yīng)合乎傳染病防控和院內(nèi)感染操縱必須，消毒隔離設(shè)備配備應(yīng)合乎
WS/T 311和《消毒技術(shù)規(guī)范》相關(guān)要求。
5.1.2傳染性疾病科、消毒殺菌供貨管理中心（室）、手術(shù)室（室）、重癥監(jiān)護(hù)室病房、血透管理中心（室）、新生嬰兒室、內(nèi)窺鏡管理中心（室）和口腔牙科等關(guān)鍵單位的工程建筑合理布局和消毒隔離應(yīng)合乎有關(guān)要求。
5.1.3清潔場地的設(shè)計(jì)方案、工程驗(yàn)收參考GB 50333規(guī)定，完工全特性檢測應(yīng)由有資質(zhì)證書的第三方企業(yè)進(jìn)行。
5.1.4 Ⅱ類自然環(huán)境和門（急）診、病房等診治場地應(yīng)按WS/T 313規(guī)定，配備適合的手衛(wèi)生設(shè)備，出示滿足要求的洗手消毒清潔液、手消毒劑及其干手設(shè)備等。
5.2二類醫(yī)療器械應(yīng)用管理方法
5.2.1 應(yīng)用的二類醫(yī)療器械應(yīng)合乎相關(guān)法律法規(guī)政策法規(guī)、規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)等管理規(guī)定，并依照準(zhǔn)許或要求的范疇和方式應(yīng)用。
5.2.2 含氯消毒液、雙氧水消毒劑等容易揮發(fā)的消毒液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用；次氯酸鈉溶液、二氧化氯等二元、多元化包裝的消毒劑活性后應(yīng)該馬上應(yīng)用。選用有機(jī)化學(xué)消毒殺菌、殺菌的醫(yī)療器械，應(yīng)用前運(yùn)用無菌水（高質(zhì)量消毒殺菌的內(nèi)窺鏡可應(yīng)用經(jīng)過慮的生活用水）充足清洗以除去殘余。不可應(yīng)用到期、無效的消毒液。不可選用室內(nèi)甲醛當(dāng)然蒸熏方式消毒殺菌醫(yī)療器械。不可選用戊二醛蒸熏方式消毒殺菌、殺菌管腔類醫(yī)療器械。
5.2.3 蒸汽滅菌器如需開展殺菌實(shí)際效果認(rèn)證，應(yīng)由省部級(jí)之上環(huán)境衛(wèi)生行政機(jī)關(guān)評(píng)定的消毒殺菌評(píng)定試驗(yàn)室開展檢驗(yàn)。殺菌物件的無菌檢測查驗(yàn)應(yīng)按《中華人民共和國藥典》“無菌檢測檢測法”規(guī)定開展。應(yīng)用消毒器械殺菌的消毒員應(yīng)經(jīng)學(xué)習(xí)培訓(xùn)達(dá)標(biāo)后才可入崗。
5.3 多次重復(fù)使用醫(yī)療器械的清理
清理程序流程應(yīng)按WS 310.2實(shí)行。有特別要求的傳染性疾病病原菌環(huán)境污染的醫(yī)療器械先要消毒殺菌再清理。
5.4 消毒滅菌方式挑選標(biāo)準(zhǔn)
5.4.1 高寬比危險(xiǎn)因素醫(yī)療器械應(yīng)用前要?dú)⒕?。輕中度危險(xiǎn)因素醫(yī)療器械應(yīng)用前要挑選高質(zhì)量消毒殺菌或中水準(zhǔn)消毒殺菌。輕度危險(xiǎn)因素器械應(yīng)用前可挑選中、適度性消毒殺菌或保持干凈。
5.4.2 耐水、耐高溫的醫(yī)療器械應(yīng)優(yōu)選工作壓力蒸氣殺菌；帶管腔和（或）帶閘閥的器械應(yīng)選用經(jīng)殺菌全過程認(rèn)證裝置( PCD)確定的殺菌程序流程或外界器材經(jīng)銷商出示的滅菌方法。
5.4.3 夾層玻璃器械、除油劑和粉劑類物件等應(yīng)優(yōu)選干熱滅菌；別的方式應(yīng)合乎《消毒技術(shù)規(guī)范》要求。
5.4.4 不耐高溫、不抗?jié)竦尼t(yī)療器械應(yīng)挑選經(jīng)國衛(wèi)行政機(jī)關(guān)準(zhǔn)許的超低溫滅菌方法。
5.4.5 多次重復(fù)使用的co2濕化瓶、吸引住瓶、寶寶暖箱水瓶座及其升溫增濕罐等宜選用高質(zhì)量消毒殺菌。
5.5 自然環(huán)境、物件表層消毒殺菌
5.5.1 自然環(huán)境、物件表層應(yīng)保持干凈；當(dāng)遭受人眼由此可見環(huán)境污染時(shí)要立即清理、消毒殺菌。
5.5.2 對(duì)治療車、床欄、床柜、門拉手、燈開關(guān)、自來水龍頭等經(jīng)常觸碰的物件表層應(yīng)每日清理、消毒殺菌。
5.5.3 被患者血夜、排泄物、糞便或微生物環(huán)境污染時(shí)，應(yīng)依據(jù)詳細(xì)情況，挑選中水準(zhǔn)之上消毒方法。針對(duì)小量（<10 mL)的濺污，可先清理再消毒殺菌；針對(duì)很多(>10 mL)血夜或血液的濺污，先要用吸潮原材料除去由此可見的環(huán)境污染，隨后再清理和消毒殺菌。
5.5.4 人員流動(dòng)經(jīng)常、擁堵的診治場地應(yīng)每日在工作中完畢后開展清理、消毒殺菌。傳染性疾病科、重癥監(jiān)護(hù)室病房、保護(hù)性隔離病房（如血液疾病病房、燙傷病房）、耐藥菌及多重耐藥菌環(huán)境污染的診治場地應(yīng)搞好隨時(shí)隨地消毒殺菌和終末消毒。
5.5.5 拖把（頭）和毛巾宜清理、消毒殺菌，干躁儲(chǔ)備用。強(qiáng)烈推薦應(yīng)用脫卸式式拖頭。
5.6 通風(fēng)換氣和室內(nèi)消毒
5.6.1 應(yīng)選用空氣流通和（或）機(jī)械設(shè)備自然通風(fēng)確保診治場地的室內(nèi)通風(fēng)和換風(fēng)；選用機(jī)械設(shè)備自然通風(fēng)時(shí)，重癥監(jiān)護(hù)室醫(yī)院病房等關(guān)鍵單位宜選用“頂排風(fēng)、下側(cè)送風(fēng)”，創(chuàng)建有效的自然通風(fēng)。
5.6.2 呼吸道發(fā)熱醫(yī)院門診以及防護(hù)留觀病區(qū)（區(qū)）、呼吸系統(tǒng)傳染性疾病接診病房如選用集中空調(diào)排風(fēng)系統(tǒng)的，應(yīng)在排風(fēng)系統(tǒng)安裝室內(nèi)消毒裝置。未選用氣體清潔技術(shù)性的診室、重癥監(jiān)護(hù)室病房、保護(hù)性隔離病房（如血液疾病病房、燙傷病房）等場地宜在排風(fēng)系統(tǒng)安裝室內(nèi)消毒裝置。
5.6.3 室內(nèi)消毒方式應(yīng)遵照《消毒技術(shù)規(guī)范》要求。不適合基本選用有機(jī)化學(xué)噴霧器開展室內(nèi)消毒。
5.7 消毒殺菌供貨管理中心（室）的管理方法
消毒殺菌供貨管理中心（室）的工程建筑合理布局及其清理、消毒滅菌和實(shí)際效果檢測應(yīng)實(shí)行WS.310規(guī)定。
5.8 廢水廢棄物解決
5.8.1 醫(yī)院門診廢水處理設(shè)備的設(shè)計(jì)方案、基本建設(shè)和管理方法應(yīng)合乎GB 18466和《醫(yī)院污水處理技術(shù)指南》規(guī)定。
5.8.2 醫(yī)療廢棄物的管理方法應(yīng)合乎《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》、《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》的規(guī)定。
5.9 疫點(diǎn)（區(qū)）消毒殺菌
應(yīng)合乎GB 19193規(guī)定。
（規(guī)范化附則）
采樣及檢查方式
A.1 采樣和檢查標(biāo)準(zhǔn)
A．1.1 采樣后應(yīng)盡早對(duì)試品開展相對(duì)指標(biāo)值的檢驗(yàn)，復(fù)檢時(shí)間不可超出4 h；若試品儲(chǔ)存于O℃～4℃時(shí)，復(fù)檢時(shí)間不可超出24 h。
A．1.2 不強(qiáng)烈推薦醫(yī)院門診基本進(jìn)行殺菌物件的無菌檢測檢查，當(dāng)臨床流行病學(xué)調(diào)研猜疑院內(nèi)感染事情與殺菌物件相關(guān)時(shí)，開展相對(duì)物件的無菌檢測檢查。基本監(jiān)管檢查并不開展高致病微生物檢驗(yàn)，涉及到疑是院內(nèi)感染爆發(fā)、院內(nèi)感染爆發(fā)調(diào)研或工作上猜疑微生物菌種環(huán)境污染時(shí)，應(yīng)開展總體目標(biāo)微生物菌種的檢驗(yàn)。
A．1.3 可應(yīng)用工作經(jīng)驗(yàn)證的當(dāng)場迅速測試儀器開展自然環(huán)境、物件表層等微生物菌種環(huán)境污染狀況和醫(yī)療器械潔凈度的監(jiān)管篩選；也可用以醫(yī)院門診清理實(shí)際效果檢查和清理程序流程的點(diǎn)評(píng)和認(rèn)證。
A.2 氣體微生物菌種環(huán)境污染檢查方式
A.2.1 采樣時(shí)間
I類自然環(huán)境在清潔系統(tǒng)軟件自凈作用后與從業(yè)診療主題活動(dòng)前采樣；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類自然環(huán)境在消毒殺菌或要求的通風(fēng)換氣后與從業(yè)診療主題活動(dòng)前采樣。
A.2.2 檢驗(yàn)方式
A.2.2.1 I類自然環(huán)境可挑選平板電腦曝露法和氣體采樣器法，參考GB 50333《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》規(guī)定開展檢驗(yàn)。氣體采樣器法可挑選六級(jí)碰撞式氣體采樣器或別的工作經(jīng)驗(yàn)證的氣體采樣器。檢驗(yàn)時(shí)將采樣器放置房間內(nèi)中間0.8 m～l.5 m高寬比，按采樣器使用手冊實(shí)際操作，每一次采樣時(shí)間不可超出30 min。屋子超過10 m2者，每提升10 m2加設(shè)一個(gè)采樣點(diǎn)。
A．2.2.2 Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類自然環(huán)境選用平板電腦曝露法。房間內(nèi)總面積≤30 m2，設(shè)內(nèi)、中、外直線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)應(yīng)距墻面1米處；房間內(nèi)總面積>30 m2，設(shè)4角及中間5點(diǎn)，4角的布點(diǎn)部位應(yīng)距墻面1米處。將一般營養(yǎng)成分瓊脂平皿(直徑90 mm)置放各取樣點(diǎn)，取樣高寬比為距路面0.8 m～l.5 m;取樣時(shí)將平皿蓋開啟，扣放于平皿旁，曝露要求時(shí)間(Ⅱ類自然環(huán)境曝露15 min，Ⅲ、Ⅳ類自然環(huán)境曝露5 min)后蓋板上平皿蓋立即復(fù)檢。
A．2.2.3將復(fù)檢平皿置36℃±1℃恒溫箱塑造48 h，記數(shù)菌體數(shù)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
A.2.3 結(jié)果測算
A．2.3.1 平板電腦曝露法按均值每皿的菌體數(shù)匯報(bào)：CFU/（皿?曝露時(shí)間）。
A．2.3.2式(1)為空氣采樣器法計(jì)算方法：
A．3 物件表層微生物菌種環(huán)境污染查驗(yàn)方式
A．3.1 取樣時(shí)間
潛在污染區(qū)、污染消毒殺菌后取樣。清潔區(qū)依據(jù)當(dāng)場狀況明確。
A．3.2 取樣總面積
被采表層<100 cm2，取所有表層；被采表層≥100 cm2，取100 cm2。
A．3.3 取樣方式
用5 cm×5 cm殺菌規(guī)格型號(hào)板放到被檢物件表層，用浸有無菌檢測0.03 mol／L聚磷酸鹽緩沖溶液或鹽水取樣液的棉拭子1支，在規(guī)格型號(hào)板內(nèi)橫縱來回各擦抹5次，并隨著旋轉(zhuǎn)棉拭子，持續(xù)取樣1～4個(gè)規(guī)格型號(hào)板總面積，剪去手觸碰一部分，將棉拭子放進(jìn)配有10 mL取樣液的試管嬰兒中復(fù)檢。門拉手等中小型物件則選用棉拭子立即擦抹物件取樣。若取樣物件表層有消毒液殘余時(shí)，取樣液應(yīng)含相對(duì)還原劑。
A．3.4 檢驗(yàn)方式
把取樣管充足震蕩后，取不一樣稀釋倍數(shù)的過柱液1.0 mL打疫苗平皿，將冷至40℃～45℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡15 mL～20 mL，36℃±1℃恒溫箱塑造48 h，記數(shù)菌體數(shù)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
A．3.5 結(jié)果測算[如式(A．2)]
A.4 醫(yī)護(hù)人員手衛(wèi)生查驗(yàn)方式
A.4.1 取樣時(shí)間
采用手衛(wèi)生后，在觸碰患者或從業(yè)診療主題活動(dòng)前取樣。
A.4.2 取樣方式
將浸有無菌檢測0.03 mol／L聚磷酸鹽緩沖溶液或鹽水取樣液的棉拭子一支在兩手指斜面從指跟得指端往返涂擦各2次（一只手涂擦總面積約30 cm2），并隨著旋轉(zhuǎn)取樣棉拭子，剪去手觸碰位置，將棉拭子放進(jìn)配有10 mL取樣液的試管嬰兒內(nèi)復(fù)檢。取樣總面積按立方厘米(cm2)測算。若采樣時(shí)手里有消毒劑殘余，采樣液應(yīng)含相對(duì)中和劑。
A.4.3 檢驗(yàn)方式
把采樣管充足震蕩后，取不一樣稀釋倍數(shù)的過柱液1．O mL打疫苗平皿，將冷至40℃～45℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡15 mL～20 mL，36℃±1℃恒溫箱塑造48 h，記數(shù)菌體數(shù)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
A．4.4 結(jié)果測算[如式(A．3)]
A．5 醫(yī)療器械查驗(yàn)方式
A．5.1 采樣時(shí)間
在消毒殺菌或殺菌解決后，儲(chǔ)放有效期限內(nèi)采樣。
A.5.2 殺菌醫(yī)療器械的查驗(yàn)方式
A．5.2.1 能用毀滅性方式抽樣的，如一次性打點(diǎn)滴（血）器、注射針和注射器等依照《中華人民共和國藥典》中“無菌檢測檢測法”開展。對(duì)不能用毀滅性方式抽樣的醫(yī)療器械，應(yīng)在自然環(huán)境潔凈度等級(jí)10 000級(jí)下的部分潔凈度等級(jí)100級(jí)的單邊流氣體地區(qū)內(nèi)或防護(hù)系統(tǒng)軟件中，用浸有無菌檢測鹽水采樣液的棉拭子在被檢物件表層擦抹，采樣取所有表層或不少于100 cm2；隨后將去除手觸碰一部分的棉拭子開展無菌檢測查驗(yàn)。
A．5.2.2 牙科手機(jī)：應(yīng)在自然環(huán)境潔凈度等級(jí)10 000級(jí)下的部分潔凈度等級(jí)100級(jí)的單邊流氣體地區(qū)內(nèi)或防護(hù)系統(tǒng)軟件中，將每一個(gè)手機(jī)上各自放置含20 mL～25 mL取樣液的無菌檢測大試管嬰兒(內(nèi)徑25 mm)中，液位高寬比應(yīng)超過4.0 cm，于旋渦混合器上清洗波動(dòng)30 s之上，取過柱液開展無菌檢測查驗(yàn)。
A.5.3 消毒殺菌醫(yī)療器械的查驗(yàn)方式
A．5.3.1 可整個(gè)放進(jìn)無菌檢測試管嬰兒的，用過柱液浸入后波動(dòng)30 s之上，取過柱液1．O mL打疫苗平皿，將冷至40℃～45℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡15 mL～20 mL，36℃±1℃恒溫箱塑造48 h，記數(shù)菌體數(shù)(CFU/件)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
A．5.3.2 能用毀滅性方式抽樣的，在100級(jí)凈化工作臺(tái)稱量1 g―lo g試品，放進(jìn)配有10 mL取樣液的試管嬰兒內(nèi)開展過柱，取過柱液1．O mL打疫苗平皿，記數(shù)菌體數(shù)(CFU/g)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。對(duì)不能用毀滅性方式抽樣的醫(yī)療器械，在100級(jí)凈化工作臺(tái)，用浸有無菌檢測鹽水取樣液的棉拭子在被檢物件表層擦抹取樣，被采表層<100 cm2，取所有表層，被采表層≥100 cm2，取100 cm2，隨后將去除手觸碰一部分的棉拭子開展過柱，取過柱液1．0 mL打疫苗平皿，將冷至40℃～45℃的熔化營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15 mL～20 mL，36℃±1℃恒溫箱塑造48 h，記數(shù)菌體數(shù)(CFU/cm2)，必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
A．5.3.3 消毒殺菌后內(nèi)窺鏡：取清理消毒殺菌后內(nèi)窺鏡，選用無菌檢測注射針提取50 mL含相對(duì)還原劑的過柱液，從穿刺活檢口引入清洗內(nèi)窺鏡管道，并全量搜集（可應(yīng)用隔膜泵）復(fù)檢。將過柱液充足攪拌，取過柱液1.0 mL打疫苗平皿，將冷至40℃～45℃的熔化營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15 mL～20 mL，36℃±1℃恒溫箱塑造48 h，記數(shù)菌體數(shù)(CFU/件)。將剩下過柱液在無菌檢測標(biāo)準(zhǔn)下選用濾紙(0. 45 μm)過慮濃縮，將濾紙打疫苗于凝結(jié)的營養(yǎng)成分瓊脂平板電腦上（留意不必造成汽泡），置36℃±1℃溫箱塑造48 h，記數(shù)菌體數(shù)。
當(dāng)濾膜法不計(jì)其數(shù)時(shí)：
菌落總數(shù)（CFU/件）=m(CFU/平板電腦)×50 ……(A．4)
式中：
m-兩平行面平板電腦的均值菌體數(shù)。
當(dāng)濾膜法可計(jì)數(shù)時(shí)：
菌落總數(shù)（CFU/件）=m(CFU/平板) mf（CFU/濾膜） …………(A．5)
式中：
m-兩平行面平板的均值菌體數(shù)；
mf -濾膜上菌體數(shù)。
A.6 消毒液查驗(yàn)方式
A.6.1 消毒液取樣
取樣分庫存量消毒液和應(yīng)用中消毒劑。
A．6.2 消毒液成分成分查驗(yàn)方式
庫存量消毒液的成分成分應(yīng)按照《消毒技術(shù)規(guī)范》或商品產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)開展檢驗(yàn)；應(yīng)用中消毒劑的合理濃度值測量能用上述情況方式，也可應(yīng)用經(jīng)國衛(wèi)行政機(jī)關(guān)準(zhǔn)許的消毒液濃度值測紙（卡）開展檢測。
A．6.3應(yīng)用中消毒劑染菌量查驗(yàn)方式
A．6.3.1 用無菌檢測塑料吸管按無菌操作原則方式汲取1.0 mL被檢消毒劑，添加9 mL還原劑中攪拌。醛類與酚類消毒劑用一般營養(yǎng)成分骨頭湯中合，含氯消毒劑、含碘消毒液和氯丁二烯消毒液用含0.1%硫代硫酸鈉還原劑，洗必泰、季銨鹽類消毒液用含0.3%吐溫80和0.3%大豆卵磷脂還原劑，代烴消毒液用含0.3%甘氨酸還原劑，帶有表活劑的各種各樣棘籽消毒液可在還原劑中添加吐溫80至3%;也可應(yīng)用該消毒液消毒殺菌實(shí)際效果檢驗(yàn)的還原劑評(píng)定實(shí)驗(yàn)明確的還原劑。
A．6.3.2 用無菌檢測塑料吸管汲取一定稀釋液占比的中合后溶液1.0 mL打疫苗平皿，將冷至40℃～45℃的熔融營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液每皿竭盡15 mL～20 mL，36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)72 h，記數(shù)菌體數(shù)；必需時(shí)分離出來高致病微生物菌種。
消毒劑染菌量(CFU／mL)=均值每皿菌體數(shù)×10×稀釋倍數(shù) …………(A．6)
A．7醫(yī)治自來水查驗(yàn)方式
血透有關(guān)醫(yī)治自來水按YY 0572開展檢驗(yàn)。別的醫(yī)治自來水依照有關(guān)規(guī)范實(shí)行。
A．8 紫外線滅菌燈查驗(yàn)方式
A．8.1 紫外線滅菌燈取樣
取樣分庫存量紫外線滅菌燈和應(yīng)用中紫外線滅菌燈。
A．8.2庫存量（新開啟）紫外線滅菌燈輻射源光照強(qiáng)度值查驗(yàn)方式
依照GB 19258開展。
A．8.3應(yīng)用中紫外線滅菌燈輻射源光照強(qiáng)度值查驗(yàn)方式
A．8.3.1 儀器設(shè)備法。打開紫外線滅菌燈5 min后，將測量光波長為253.7 nm的紫外光輻照度計(jì)攝像頭放置被檢紫外線滅菌燈下安全距離1米的中間處，待儀表盤平穩(wěn)后，所顯示數(shù)據(jù)信息即是該紫外線滅菌燈的輻射源光照強(qiáng)度值。
A．8.3.2 標(biāo)示卡法。打開紫外線滅菌燈5 min后，將標(biāo)示卡置紫外線殺菌燈下安全距離1米處，有圖案設(shè)計(jì)一面朝上，直射1 min，觀查標(biāo)示卡圖形的色調(diào)，將其與規(guī)范圖形較為。
A．8.4常見問題
紫外光輻照度計(jì)應(yīng)在計(jì)量檢定單位計(jì)量檢定的有效期限內(nèi)應(yīng)用；紫外光檢測標(biāo)示卡應(yīng)獲得國衛(wèi)行政機(jī)關(guān)的批準(zhǔn)批文，并在商品有效期限內(nèi)應(yīng)用。
A．9 消毒器械查驗(yàn)方式
A．9.1 除菌因素抗壓強(qiáng)度測量：按《消毒技術(shù)規(guī)范》或公司標(biāo)準(zhǔn)的方式開展檢驗(yàn)。
A．9.2辦公環(huán)境有害物質(zhì)濃度值（抗壓強(qiáng)度）測量：按《消毒技術(shù)規(guī)范》或有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的方式開展檢驗(yàn)。
A．10 醫(yī)院污水查驗(yàn)方式
按GB 18466要求開展檢驗(yàn)。
A. 11 疫點(diǎn)（區(qū)）消毒殺菌實(shí)際效果檢驗(yàn)方式
按GB 19193要求開展檢驗(yàn)。
A．12 大腸桿菌查驗(yàn)方式
依照GB 4789.3開展檢驗(yàn)。
A．13 沙門茵查驗(yàn)方式
依照GB 4789.4開展檢驗(yàn)。
A. 14 乙型肝炎血溶鏈球菌感染查驗(yàn)方式
依照GB/T 4789.11開展檢驗(yàn)。
A．15 銅綠假單胞菌查驗(yàn)方式
依照GB 7918.4開展檢驗(yàn)。
A．16 橙黃色鏈球菌查驗(yàn)方式
依照GB 7918.5開展檢驗(yàn)。
A．17 別的總體目標(biāo)微生物菌種查驗(yàn)方式
依照有關(guān)檢驗(yàn)方式開展。
（規(guī)范化附則）
實(shí)驗(yàn)試劑和培養(yǎng)液
B．1 0.03 moI/L聚磷酸鹽緩沖溶液(0.03 moI/L PBS)
稱量磷酸氫二鈉2.84 g，磷酸二氫鉀1.36 g，添加到1000 mL純凈水中，待徹底融解后，調(diào)pH至7. 2～7.4，于121℃工作壓力蒸氣殺菌20 min。
B．2過柱液
稱量蛋白胨10. 00 g，氧化鈉8.50 g，吐溫-80 1.0ML，添加到1 000 mL 0.03mol/L聚磷酸鹽緩沖溶液中，加溫融解后調(diào)pH至7.2～7.4，于121℃工作壓力蒸氣殺菌20 min。
B．3鹽水
稱量氧化鈉8. 50 g，融解于1000 mL純凈水中，于121℃工作壓力蒸氣殺菌20 min。
B．4 革蘭氏染色液及上色方式
B.4.1 結(jié)晶紫上色液：稱量結(jié)晶紫1.00 g，融解于20 mL 95%乙醇中，隨后與80 mL 1%草酸銨溶液混和。
B．4.2革蘭碘液：稱量碘1. 00 g，碘化鉀2.00 g，混和后添加純凈水少量，充足振搖，待徹底融解后，再加純凈水至300 mL，攪拌。
B．4.3沙黃復(fù)染色液：稱量沙黃0. 25 g，融解于10 mL 95%酒精溶液中，隨后添加90 mL純凈水，攪拌。
B．4.4上色方式以下：
a)將玻片在火苗上固定不動(dòng)。
b)滴入結(jié)晶紫上色液，功效1 min，水清洗。
c) 滴加革蘭碘液，功效1min，水清洗。
d)乙醇褪色30 s；或?qū)⒁掖嫉螡M全部玻片，馬上傾去，再用乙醇滴滿全部玻片，褪色10 s。
e)水清洗，滴沙黃復(fù)染色液，功效1 min，水清洗。
f) 待干鏡檢查。
B．5人（兔）血液
取殺菌3.8%三聚磷酸鈉1份，加微信好友（兔）全血4份，攪拌靜放，3 000 r／min抽濾5 min，取上清，棄血球。
B．6 一般營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液
B．6.1 成份：蛋白胨10 g、牛肉膏5G、氧化鈉5G、瓊脂15 g、純凈水1000 mL。
B．6.2做法：除瓊脂外別的成份融解于純凈水中，調(diào)pH至7.2～7.4，添加瓊脂，加溫融解，散裝于121℃工作壓力蒸氣殺菌20 min。
B．7血瓊脂培養(yǎng)液
B．7.1 成份：營養(yǎng)成分瓊脂100 mL、脫化學(xué)纖維羊血（或兔血）10 mL。
B．7.2做法：將營養(yǎng)成分瓊脂加溫熔融待冷至50℃上下，以無菌操作原則將10 mL脫化學(xué)纖維血添加后混勻，竭盡平皿，置電冰箱預(yù)留。
B．8 需-綠膿桿菌培養(yǎng)液
B．8.1成份：酪胨（胰酶水解反應(yīng)）15 g、牛肉膏4g、葡萄糖水5G、氧化鈉2.5 g、L-胱氨酸0.5 g、硫酒精酸鈉緩釋片0.5 g、酵母菌浸取粉5 g、新鮮配置的0.1%刃天青溶液1．o mL或新配置的0.2%亞甲藍(lán)溶液0.5 mL、瓊脂0.5 g～0. 7g、純凈水1 000 mL。
B．8.2做法：除葡萄糖水和刃天青溶液外，取以上成份添加純凈水中，微溫融解后，調(diào)pH至弱堿性，燒開、濾清，添加葡萄糖水和刃天青溶液，混勻，調(diào)pH至6.9～7.3，散裝后115℃工作壓力蒸氣殺菌30 min。
B．9 SCDLP液體培養(yǎng)基
B．9.1 成份：opo結(jié)構(gòu)脂胨17 g、黃豆蛋白胨4g、葡萄糖水2.5 g、氧化鈉5G、磷酸氫二鉀2.5 g、大豆卵磷脂lg、吐溫-80 7g、純凈水1 000 mL。
B．9.2做法：將各種各樣成份混和（如無opo結(jié)構(gòu)脂胨和黃豆蛋白胨能用日本多胨替代），加溫融解后，調(diào)pH至7.2～7.3，散裝于121℃工作壓力蒸氣殺菌20 min，混勻，冷至25℃應(yīng)用。
B．10伊紅美藍(lán)培養(yǎng)液
B．10.1成份：蛋白胨10 g、乳清蛋白10 g、磷酸二氫鉀3g、2%伊紅水溶液2 mL、0.65%美藍(lán)水溶液1 mL、瓊脂17 g、純凈水1000 mL。
B．10.2做法：將蛋白胨、聚磷酸鹽和瓊脂融解于純凈水中，調(diào)pH至7.1，散裝后121℃工作壓力蒸氣殺菌20 min。臨用時(shí)，以無菌操作原則添加乳清蛋白并加溫融化瓊脂，冷至50℃時(shí)，添加伊紅和美藍(lán)水溶液混勻，竭盡平皿，置4℃電冰箱預(yù)留。
B．11 0.5%葡萄糖水骨頭湯培養(yǎng)液
B．11.1 成份：胨10 g、氧化鈉5G、葡萄糖水5G、肉浸液1000 mL。
B．11.2做法：取胨與氧化鈉添加肉浸液內(nèi)，微溫融解后，調(diào)pH至弱堿性，燒開，添加葡萄糖水融解后，混勻，濾清，調(diào)pH至7.0～7.4，散裝，于115℃工作壓力蒸氣殺菌30 min。
B．12甘露醇培養(yǎng)液
B．12.1 成份：蛋白胨10 g、牛肉膏5G、氧化鈉5G、甘露醇10 g、0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液12 mL、純凈水1 000 mL。
B．12.2 將蛋白胨、氧化鈉、牛肉膏添加純凈水中，加溫融解，調(diào)pH至7.4，添加甘露醇和溴麝香草酚藍(lán)攪拌后，散裝，于115℃工作壓力蒸氣殺菌20 min。
B．13 乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管 GB 15982-2012
B．13.1成份：蛋白胨20 g、豬膽鹽（或牛，羊膽鹽）5G、乳清蛋白10 g、0.04%溴甲酚紫水溶液25 mL、純凈水1 000ML。
B．13.2做法：將蛋白胨、膽鹽及乳清蛋白融解于純凈水中，調(diào)pH至7.4，添加0.04%溴甲酚紫水溶液，散裝(每管10 mL)，并放進(jìn)一個(gè)發(fā)醇管，于115℃工作壓力蒸氣殺菌15 min。
B．14乳清蛋白發(fā)醇管
B．14.1 成份：蛋白胨20 g、乳清蛋白10 g、0.04%溴甲酚紫溶液25mL、純凈水1 000 mL。
B．14.2做法：將蛋白胨及乳清蛋白融解于純凈水中，調(diào)pH至7.4，添加0.04%溴甲酚紫溶液，散裝(每管10 mL)，并放進(jìn)一個(gè)發(fā)醇管，于115℃工作壓力蒸氣殺菌15 min。
B．15溴甲酚紫葡萄糖水蛋白胨水培養(yǎng)液
B．15.1 成份：蛋白胨10 g、葡萄糖水5G、2%溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL、純凈水1000 mL。
B．15.2做法：將蛋白胨、葡萄糖水融解于純凈水中，調(diào)pH至7．O～7.2，添加2%溴甲酚紫酒精溶液，混勻后，散裝(每管5 mL)，并放進(jìn)一個(gè)發(fā)醇管，于115℃工作壓力蒸氣殺菌30 min，置4℃電冰箱預(yù)留。
B．16綠膿菌素測量用培養(yǎng)基
B．16.1 胨20 g、氧化鎂（沒有水）1.4 g、硫酸銨10 g、凡士林10 mL、瓊脂18 g～20 g、純凈水1 000 mL。
B．16.2做法：取胨、氧化鎂、硫酸銨添加水里，微溫使融解，調(diào)整pH使殺菌后為7.2～7.4，散裝于小試管嬰兒，殺菌。
B．17 果膠培養(yǎng)基
B．17.1 胨5 g、果膠120 g、牛羊肉浸取粉4g、純凈水1 000 mL。
B．17.2取以上各成份添加水里，泡浸約20 min，隨時(shí)隨地拌和，加溫使融解，調(diào)整pH值使殺菌后為7.2～7.4，散裝于小試管嬰兒，殺菌。
B．18 常見問題
B．18.1 三料乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管除純凈水外，別的成份為乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管的2倍；3倍濃縮乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管除純凈水外，別的成份為乳清蛋白膽鹽發(fā)醇管的3倍。
B．18.2培養(yǎng)液用的試管嬰兒口和三角燒瓶口運(yùn)用棉塞或硅橡膠做成的瓶塞，再用包裝紙包好。
B．18.3實(shí)驗(yàn)試劑與培養(yǎng)液配置好后應(yīng)置清理處儲(chǔ)存，常溫狀態(tài)不超過1個(gè)月。培養(yǎng)液強(qiáng)烈推薦4℃冷凍儲(chǔ)存。
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