無菌室限度化技術(shù)規(guī)范與施工驗(yàn)收規(guī)范 (含《清理室沉降菌測(cè)試限度安全操作規(guī)程》),
, 1.目地,　　本規(guī)程致力于為無菌操作原則及無菌室的愛惜出示一個(gè)限度化技術(shù)規(guī)范。, 2.可用局限性,　　生測(cè)試驗(yàn)室, 3.責(zé)任人,　　QC負(fù)責(zé)人生測(cè)員, 4.界說,　　無, 5.安全重視事宜,　　嚴(yán)苛無菌操作原則，避免微生物污染；實(shí)際操作員工進(jìn)到無菌室先要關(guān)閉紫外線殺菌燈。, , 6.技術(shù)規(guī)范,　　6.1.無菌室應(yīng)設(shè)立無菌操作原則間緩解沖間，無菌操作原則間潔凈度應(yīng)抵達(dá)10000級(jí)，室溫維持在20-24℃，環(huán)境濕度維持在45-60%。超凈工作臺(tái)潔凈度應(yīng)抵達(dá)100級(jí)。,　　6.2.無菌室應(yīng)保持干凈，禁止堆積臟物，防止污染。,　　6.3.堅(jiān)決杜絕一切殺菌器械和培育基污染，已污染者應(yīng)住手應(yīng)用。,　　6.4.無菌室應(yīng)常備事情濃度值的消毒劑，如5％的甲酚水溶液，70％的乙醇，0.1％的新潔爾滅水溶液，這些。,　　6.5.無菌室應(yīng)按時(shí)用適宜的消毒劑殺菌清理，以確保無菌室的潔凈度相符合規(guī)定。,　　6.6.必須帶到無菌室應(yīng)用的儀器設(shè)備，器材，平皿等一切物件，均應(yīng)捆扎嚴(yán)實(shí)，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法殺菌。,　　6.7.事情員工進(jìn)到無菌室前，務(wù)必用香皂或消毒液洗手消毒殺菌，隨后在緩沖間更換專用型事情服，鞋，遮陽(yáng)帽，防護(hù)口罩和膠手套(或用70%的酒精再度擦洗兩手)，即可進(jìn)到無菌室舉辦實(shí)際操作。,　　6.8.無菌室應(yīng)用前務(wù)必開啟無菌室的紫外線殺菌燈輻照滅菌三十分鐘之上，并且另外開啟超凈工作臺(tái)舉辦吹風(fēng)機(jī)。實(shí)際操作結(jié)束，應(yīng)即時(shí)梳理無菌室，再用紫外線殺菌燈輻照滅菌二十分鐘。,　　6.9.供試品在查驗(yàn)前，應(yīng)維持外包裝盒詳細(xì)，不可打開，防止污染。查驗(yàn)前，用70％的酒精棉球消毒殺菌外外邊。,　　6.10.每一次實(shí)際操作過程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以查驗(yàn)無菌操作原則的穩(wěn)定性。,　　6 .11.消化吸收菌液時(shí)，務(wù)必用吸耳球消化吸收，切忌立即用口觸碰塑料吸管。,　　6.12.接種針每一次應(yīng)用前后左右，務(wù)必通偏執(zhí)焰燒灼殺菌，待制冷后，即可打疫苗培育物。,　　6.13.含有菌液的塑料吸管，試管嬰兒，培育皿等容器應(yīng)泡浸在盛滿5%來蘇爾水溶液的消毒殺菌桶內(nèi)消毒殺菌，24小時(shí)后取下清洗。,　　6.14.若有菌液灑在桌子或地面上，應(yīng)立刻用5%石碳酸水溶液或3％的來蘇爾坍塌在被污染處最少三十分鐘，再做處理。事情衣服帽子等遭受菌液污染時(shí)，應(yīng)立刻脫去，髙壓蒸氣殺菌后清洗。,　　6.15.凡含有活菌的物件，務(wù)必經(jīng)消毒殺菌后，才華在自來水龍頭下清洗，禁止污染下水管道。,　　6.16.無菌室應(yīng)每月查驗(yàn)菌體數(shù)。在潔凈事情臺(tái)打開的情況下，取內(nèi)徑90mm的無菌檢測(cè)培育皿多個(gè)，無菌操作原則區(qū)劃引入溶化并制冷至約45℃的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培育基約15ml，放到凝結(jié)后，倒放置30～35℃培育箱培育兩天，確認(rèn)無菌檢測(cè)后，取平板電腦3～五個(gè)，區(qū)劃置放事情部位的左中右等處，打開表蓋外露三十分鐘后，倒放置30～35℃培育箱培育兩天，取下查驗(yàn)。100級(jí)清潔區(qū)平板電腦霉菌數(shù)均值不可超越一個(gè)菌體，10000級(jí)清理室均值不可超越3個(gè)菌體。如超越程度，解決無菌室舉辦完全消毒殺菌，直到反復(fù)查驗(yàn)符合規(guī)定截止。, 7.參考,　　參考《藥品衛(wèi)生磨練方式》 《中國(guó)藥品磨練尺度操作規(guī)范》中(無菌檢測(cè)檢測(cè)法)章節(jié)目錄 我國(guó)醫(yī)療行業(yè)限度YY/T0188.6-1995《藥品磨練操作規(guī)程》, 8.派發(fā)單位,　　品質(zhì)整治部,無菌室技藝具體指導(dǎo)表明,　　在得到了無菌檢測(cè)自然環(huán)境和無菌檢測(cè)材料后，大家也要維持無菌檢測(cè)情況，才華對(duì)某類特殊的已經(jīng)知道微生物舉辦科學(xué)研究或履行他們的作用，不然外部的諸多微生物非常容易滲入。外部不有關(guān)的微生物滲入的跡象，在微生物學(xué)中大家稱為污染霉菌。避免污染是微生物學(xué)事情中十分重要的技藝。一方面是完全殺菌，另一方面避免污染，是無菌檢測(cè)技藝的2個(gè)層面。此外，大家也要避免所科學(xué)研究的微生物，新奇是發(fā)病微生物或經(jīng)過基因工程技術(shù)更新了的本來大自然不會(huì)有的微生物從大家的試驗(yàn)器皿中肇事逃逸到外部自然環(huán)境中去。為了更好地這種目地，在微生物學(xué)中，有很多對(duì)策。,　　無菌室內(nèi)的路面、墻面務(wù)必整平，不容易藏污，以便蕩滌。事情臺(tái)的櫥柜臺(tái)面應(yīng)當(dāng)處在水準(zhǔn)情況。無菌室緩解沖間都配有紫外線滅菌燈，無菌室的紫外線滅菌燈間距事情櫥柜臺(tái)面一米。事情員工進(jìn)到無菌室應(yīng)穿滅過菌的服飾，戴帽。,　　當(dāng)今無菌室多存有于微生物加工廠，一樣平常試驗(yàn)室則應(yīng)用超凈工作臺(tái)。超凈工作臺(tái)其關(guān)鍵作用是履行氣體層.流設(shè)備清理事情櫥柜臺(tái)面上端囊括微生物以內(nèi)的諸多細(xì)微塵土。根據(jù)電動(dòng)式設(shè)備使氣體根據(jù)高效過濾用品后進(jìn)到事情櫥柜臺(tái)面，使櫥柜臺(tái)面持續(xù)保持在流動(dòng)性無菌檢測(cè)氣體操縱下。并且在挨近外界的一方有一道髙速流動(dòng)性的氣簾避免外界細(xì)菌很多氣體進(jìn)到。,　　在標(biāo)準(zhǔn)較難點(diǎn)的地區(qū)，還可以用木質(zhì)無菌檢測(cè)箱替代超凈工作臺(tái)。無菌檢測(cè)箱構(gòu)造樸素，以便挪動(dòng)，箱正臉開有兩個(gè)洞，不實(shí)際操作時(shí)要推拉門式側(cè)門遮住，實(shí)際操作時(shí)能夠?qū)⑹直廴M(jìn)去。正臉上端配有夾層玻璃，以便在內(nèi)部實(shí)際操作，箱內(nèi)部配有紫外線滅菌燈，從側(cè)邊側(cè)門能夠裝進(jìn)去用品和菌苗等。,運(yùn)用,無菌操作原則技藝當(dāng)今不但在微生物學(xué)科學(xué)研究和運(yùn)用處起著至關(guān)重要的功效，并且在很多微生物技藝中也被廣泛運(yùn)用。比如轉(zhuǎn)基因水稻技藝、單抗技藝等。,
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, 1 目地：建立清理室中沉降菌的測(cè)試限度安全操作規(guī)程，確保藥物在劃分清理等級(jí)內(nèi)舉辦生產(chǎn)制造。,
2 局限性：清理室的沉降菌的檢測(cè)。,
3 根據(jù)：我國(guó)限度 GB/T 16294-1996 。,
4 崗位職責(zé)： QA 潔凈度檢測(cè)員工、微生物磨煉員工對(duì)本規(guī)章制度的實(shí)行用心。,
5 內(nèi)容
5.1清理室：對(duì)細(xì)顆粒物及微生物污染劃分需舉辦自然環(huán)境操縱的屋子或地區(qū)。,
5.2清理事情臺(tái)：一種事情臺(tái)或是與這類一樣一個(gè)封禁施工圍擋事情區(qū)。其特性是本身可以供貨經(jīng)過過慮的氣體或汽體，如豎直層.流清理罩、水準(zhǔn)層流罩、豎直層.流清理事情臺(tái)、水準(zhǔn)層.流清理事情臺(tái)、自凈作用器等。,
5.3潔凈度：清理自然環(huán)境內(nèi)模塊容積空氣中含超過或就是某一粒度飄浮顆粒的容許統(tǒng)計(jì)分析數(shù)。,
5.4菌體：病菌培育后，由一個(gè)或好多個(gè)病菌滋長(zhǎng)而產(chǎn)生的一病菌集落，通稱CFU。一般 用數(shù)量提示。,
5.5測(cè)試方法
5.5.1方法簡(jiǎn)述：本測(cè)試方法履行地基沉降法，即根據(jù)當(dāng)然地基沉降基本原理互聯(lián)網(wǎng)在空氣中的微生物顆粒于培育基平皿，經(jīng)兩天之上培育，在適宜的標(biāo)準(zhǔn)下讓其滋長(zhǎng)到由此可見的菌體數(shù)，來鑒定清理自然環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并為此來鑒定清理室的 潔凈度。
5.5.2常用的儀器設(shè)備和武器裝備
5.5.2.1髙壓滅菌鍋：應(yīng)用時(shí)參考文檔GZ-ZL-SOP-066-00舉辦實(shí)際操作。
5.5.2.2控溫培育箱：務(wù)必按時(shí)對(duì)培育箱的溫度表舉辦計(jì)量檢定。
5.5.2.3培育皿：一樣平常接受中90mm×15mm硼氯化鎂夾層玻璃培育皿。應(yīng)用前將培育皿放置121℃濕熱滅菌二十分鐘。
5.5.2.4培育基：簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培育基。將培育基加溫熔融，制冷至約45℃在無菌操作原則條
件下將培育基引入培育皿，每皿約15m1。待瓊脂培育基凝結(jié)后，將培育基平皿放進(jìn)30～35℃控溫培育箱中培育數(shù)鐘頭，若培育基平皿上確實(shí)沒有菌體生長(zhǎng)發(fā)育，就可以供取樣用，制取好的培育基平皿應(yīng)在2～8℃的自然環(huán)境中儲(chǔ)放。
5.5.3測(cè)試流程
5.5.3.1取樣方法：將已制取好的培育皿置放在預(yù)先確定的抽樣點(diǎn)，開啟培育皿蓋，使培育基外邊外露0.5鐘頭，再將培育皿蓋上蓋后顛倒。
5.5.3.2培育：全部取樣竣事，將培育皿倒放置控溫培育箱中培育。在30～35℃培育，時(shí)間不少于兩天。每次培育基應(yīng)該有對(duì)比實(shí)驗(yàn)，查驗(yàn)培育基自身是不是污染，可每次選中3只培育皿作對(duì)比培育。
5.5.3.3菌落計(jì)數(shù)：用人眼立即記數(shù)，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗(yàn)，有無忽略。若培育皿上面有兩個(gè)或兩個(gè)之上菌體重合，可辨別時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)之上的菌落計(jì)數(shù)。,
5.6重視事宜
4.6.1測(cè)試用品要做殺菌處理，以保證 測(cè)試的穩(wěn)定性、精確性。
5.6.2接受一切對(duì)策避免人為因素對(duì)樣版的污染。
5.6.3對(duì)培育基、培育標(biāo)準(zhǔn)以及他主要參數(shù)作詳盡的記錄。
5.6.4因?yàn)榧?xì)菌種類多種多樣，差別甚大，記數(shù)時(shí)一樣平常用散射光于培育皿之后或正臉細(xì)心調(diào)查，不必漏計(jì)培育皿邊沿生長(zhǎng)發(fā)育的菌體，并須重視細(xì)菌菌落與培育基沉淀的差別，必須時(shí)要光學(xué)顯微鏡辨別。
5.6.5取樣前要認(rèn)真仔細(xì)每一個(gè)培育皿的品質(zhì)，如發(fā)覺霉變、損壞或污染的應(yīng)去除。,
5.7測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
5.7.1測(cè)試情況
5.7.1.1沉降菌測(cè)試前：被測(cè)試清理室（區(qū)）的溫度濕度須抵達(dá)劃分的規(guī)定，負(fù)壓差、務(wù)必操縱在劃分值內(nèi)。被測(cè)試清理室（區(qū)）已消毒。
5.7.1.2測(cè)試情況有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動(dòng)態(tài)性二種，并在敘述中標(biāo)明測(cè)試情況。
5.7.1.3測(cè)試員工：測(cè)試員工務(wù)必衣著相符合自然環(huán)境潔凈度級(jí)其他事情服。靜態(tài)數(shù)據(jù)測(cè)試時(shí)，房間內(nèi)測(cè)試員工不可超過2自我個(gè)人。
5.7.2測(cè)試時(shí)間
5.7.2.1對(duì)單邊流，如100級(jí)凈化處理屋子里及層.流事情臺(tái)，測(cè)試應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于十分鐘后最開始。
5.7.2.2對(duì)非單邊流，如10000級(jí)、100000級(jí)之上的凈化處理屋子，測(cè)試應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于三十分鐘最開始。,
5.8沉降菌記數(shù)
5.8.1至少取樣點(diǎn)數(shù)量：可按表1明確。在滿足至少測(cè)等級(jí)的另外，還宜滿足至少培育皿數(shù)，見表2。
表1至少取樣點(diǎn)數(shù)量
總面積(m2)           潔凈度等級(jí)
            100  10000  100000  300000
＜10        2～3  2      2     2
≥10～＜20  4     2      2     2
≥20～＜40  8     2      2     2
≥40～＜100  16    4      2     2
≥100～＜200  40   10     3     3
注：表格中的總面積針對(duì)單邊流清理室就是指排風(fēng)總面積，針對(duì)非單邊流清理室就是指屋子總面積。
表2至少培養(yǎng)皿數(shù)
潔凈度等級(jí) 所需Φ90mm培養(yǎng)皿數(shù)（以地基沉降0.5鐘頭計(jì)）
  100             14
  10000            2
  100000           2
  300000           2
5.8.2取樣點(diǎn)的布署：事兒區(qū)測(cè)試用例部位距地0.8～1.5m上下（稍高于事人情世故）。可在重要武器裝備或重要事兒流動(dòng)性局限性處增加測(cè)量點(diǎn)，取樣點(diǎn)的布署應(yīng)爭(zhēng)取均值，阻攔取樣點(diǎn)在某 部分地區(qū)過度集中化，某部分地區(qū)過度希奇。
5.8.3記錄：檢測(cè)敘述中應(yīng)記錄屋子溫度、空氣濕度、壓力差、測(cè)試狀態(tài)及數(shù)據(jù)測(cè)試。
5.8.4實(shí)際效果籌算：用記數(shù)方法得到每個(gè)培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。均值菌體數(shù)的籌算見上式：
m1 m2 …… mn
均值菌體數(shù)m=n
式中：m為均值菌體數(shù)；m1為2號(hào)培養(yǎng)皿菌體數(shù)；m2為2號(hào)培養(yǎng)皿菌體數(shù)；mn為n號(hào)培養(yǎng)皿菌體數(shù)；n為培養(yǎng)皿數(shù)量。
5.8.5實(shí)際效果鑒定：用均值菌體數(shù)分辨清理室的空氣中的微生物菌種。
5.8.6清理室（區(qū)）內(nèi)的均值菌體數(shù)務(wù)必小于所選中的鑒定限度（見表3）。
5.8.7若某清理室（區(qū)）的均值菌體數(shù)超越鑒定限度，則務(wù)必對(duì)于此事地區(qū)優(yōu)先消毒殺菌，隨后再次檢測(cè)2次，檢測(cè)實(shí)際效果務(wù)必合格。
表3 
清理等級(jí)     100級(jí)   10000級(jí)   100000級(jí)   300000級(jí)
限度（均值）  一個(gè)/皿  3個(gè)/皿    10個(gè)/皿    15個(gè)/皿,
, 無菌車間限度化技術(shù)規(guī)范與施工驗(yàn)收規(guī)范 (含《清潔室沉降菌測(cè)試尺度操作規(guī)程》),

無菌車間限度化技術(shù)規(guī)范與施工驗(yàn)收規(guī)范(含《清潔室沉降菌測(cè)試尺度操作規(guī)程》)

1.目地

　　本規(guī)程致力于為無菌操作原則及無菌車間的愛惜出示一個(gè)限度化技術(shù)規(guī)范。

2.可用局限性

　　生測(cè)試驗(yàn)室

3.責(zé)任人

　　QC負(fù)責(zé)人生測(cè)員

4.界說

　　無

5.安全重視事宜

　　嚴(yán)苛無菌操作原則，避免微生物菌種環(huán)境污染；實(shí)際操作員工進(jìn)到無菌車間先要關(guān)閉紫外線殺菌燈。

6.技術(shù)規(guī)范

　　6.1.無菌車間應(yīng)設(shè)立無菌操作原則間緩解沖間，無菌操作原則間潔凈度應(yīng)抵達(dá)10000級(jí)，室溫維持在20-24℃，環(huán)境濕度維持在45-60%。超凈工作臺(tái)潔凈度應(yīng)抵達(dá)100級(jí)。

　　6.2.無菌車間應(yīng)保持干凈，禁止堆積臟物，防止環(huán)境污染。

　　6.3.堅(jiān)決杜絕一切殺菌器械和培養(yǎng)基環(huán)境污染，已污染者應(yīng)住手應(yīng)用。

　　6.4.無菌車間應(yīng)常備事兒濃度值的消毒劑，如5％的甲酚水溶液，70％的乙醇，0.1％的新潔爾滅水溶液，這些。

　　6.5.無菌車間應(yīng)按時(shí)用適宜的消毒劑殺菌清理，以確保無菌車間的潔凈度相符合規(guī)定。

　　6.6.必須帶到無菌車間應(yīng)用的儀器設(shè)備，器材，平皿等一切物件，均應(yīng)捆扎嚴(yán)實(shí)，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法殺菌。

　　6.7.事兒?jiǎn)T工進(jìn)到無菌車間前，務(wù)必用香皂或消毒液洗手消毒殺菌，隨后在緩沖間更換專用型事兒服，鞋，遮陽(yáng)帽，防護(hù)口罩和膠手套(或用70%的酒精再度擦洗兩手)，即可進(jìn)到無菌車間舉辦實(shí)際操作。

　　6.8.無菌車間應(yīng)用前務(wù)必開啟無菌車間的紫外線殺菌燈輻照滅菌三十分鐘之上，并且另外開啟超凈工作臺(tái)舉辦吹風(fēng)機(jī)。實(shí)際操作結(jié)束，應(yīng)即時(shí)梳理無菌車間，再用紫外線殺菌燈輻照滅菌二十分鐘。

　　6.9.供試品在查驗(yàn)前，應(yīng)維持外包裝盒詳細(xì)，不可打開，防止環(huán)境污染。查驗(yàn)前，用70％的酒精棉球消毒殺菌外外邊。

　　6.10.每一次實(shí)際操作過程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以查驗(yàn)無菌操作原則的穩(wěn)定性。

　　6 .11.消化吸收菌液時(shí)，務(wù)必用吸耳球消化吸收，切忌立即用口觸碰塑料吸管。

　　6.12.接種針每一次應(yīng)用前后左右，務(wù)必通偏執(zhí)焰燒灼殺菌，待制冷后，即可打疫苗培養(yǎng)物。

　　6.13.含有菌液的塑料吸管，試管嬰兒，培養(yǎng)皿等容器應(yīng)泡浸在盛滿5%來蘇爾水溶液的消毒殺菌桶內(nèi)消毒殺菌，24小時(shí)后取下清洗。

　　6.14.若有菌液灑在桌子或地面上，應(yīng)立刻用5%石碳酸水溶液或3％的來蘇爾坍塌在被環(huán)境污染處最少三十分鐘，再做處理。事兒衣服帽子等遭受菌液環(huán)境污染時(shí)，應(yīng)立刻脫去，髙壓蒸氣殺菌后清洗。

　　6.15.凡含有活菌的物件，務(wù)必經(jīng)消毒殺菌后，才華在自來水龍頭下清洗，禁止環(huán)境污染下水管道。

　　6.16.無菌車間應(yīng)每月查驗(yàn)菌體數(shù)。在潔凈事兒臺(tái)打開的情況下，取內(nèi)徑90mm的無菌檢測(cè)培養(yǎng)皿多個(gè)，無菌操作原則區(qū)劃引入溶化并制冷至約45℃的營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)基約15ml，放到凝結(jié)后，倒放置30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)兩天，確認(rèn)無菌檢測(cè)后，取平板電腦3～五個(gè)，區(qū)劃置放事兒部位的左中右等處，打開表蓋外露三十分鐘后，倒放置30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)兩天，取下查驗(yàn)。100級(jí)清潔區(qū)平板電腦霉菌數(shù)均值不可超越一個(gè)菌體，10000級(jí)清理室均值不可超越3個(gè)菌體。如超越程度，解決無菌車間舉辦完全消毒殺菌，直到反復(fù)查驗(yàn)符合規(guī)定截止。

7.參考

　　參考《藥品衛(wèi)生磨練方式》 《中國(guó)藥品磨練尺度操作規(guī)范》中(無菌檢測(cè)檢測(cè)法)章節(jié)目錄 我國(guó)醫(yī)療行業(yè)限度YY/T0188.6-1995《藥品磨練操作規(guī)程》

8.派發(fā)單位

　　品質(zhì)整治部

無菌車間技藝具體指導(dǎo)表明

　　在得到了無菌檢測(cè)自然環(huán)境和無菌檢測(cè)材料后，大家也要維持無菌檢測(cè)情況，才華對(duì)某類特殊的已經(jīng)知道微生物菌種舉辦科學(xué)研究或履行他們的作用，不然外部的諸多微生物菌種非常容易滲入。外部不有關(guān)的微生物菌種滲入的跡象，在分子生物學(xué)中大家稱為環(huán)境污染霉菌。避免環(huán)境污染是分子生物學(xué)事兒中十分重要的技藝。一方面是完全殺菌，另一方面避免環(huán)境污染，是無菌檢測(cè)技藝的2個(gè)層面。此外，大家也要避免所科學(xué)研究的微生物菌種，新奇是發(fā)病微生物菌種或經(jīng)過基因工程技術(shù)更新了的本來大自然不會(huì)有的微生物菌種從大家的試驗(yàn)器皿中肇事逃逸到外部自然環(huán)境中去。為了更好地這種目地，在分子生物學(xué)中，有很多對(duì)策。

　　無菌車間內(nèi)的路面、墻面務(wù)必整平，不容易藏污，以便蕩滌。事兒臺(tái)的櫥柜臺(tái)面應(yīng)當(dāng)處在水準(zhǔn)情況。無菌車間緩解沖間都配有紫外線滅菌燈，無菌車間的紫外線滅菌燈間距事兒櫥柜臺(tái)面一米。事兒?jiǎn)T工進(jìn)到無菌車間應(yīng)穿滅過菌的服飾，戴帽。

　　當(dāng)今無菌車間多存有于微生物菌種加工廠，一樣平常試驗(yàn)室則應(yīng)用超凈工作臺(tái)。超凈工作臺(tái)其關(guān)鍵作用是履行氣體層.流設(shè)備清理事兒櫥柜臺(tái)面上端囊括微生物菌種以內(nèi)的諸多細(xì)微塵土。根據(jù)電動(dòng)式設(shè)備使氣體根據(jù)高效過濾用品后進(jìn)到事兒櫥柜臺(tái)面，使櫥柜臺(tái)面持續(xù)保持在流動(dòng)性無菌檢測(cè)氣體操縱下。并且在挨近外界的一方有一道髙速流動(dòng)性的氣簾避免外界細(xì)菌很多氣體進(jìn)到。

　　在標(biāo)準(zhǔn)較難點(diǎn)的地區(qū)，還可以用木質(zhì)無菌檢測(cè)箱替代超凈工作臺(tái)。無菌檢測(cè)箱構(gòu)造樸素，以便挪動(dòng)，箱正臉開有兩個(gè)洞，不實(shí)際操作時(shí)要推拉門式側(cè)門遮住，實(shí)際操作時(shí)能夠?qū)⑹直廴M(jìn)去。正臉上端配有夾層玻璃，以便在內(nèi)部實(shí)際操作，箱內(nèi)部配有紫外線滅菌燈，從側(cè)邊側(cè)門能夠裝進(jìn)去用品和菌苗等。

運(yùn)用

無菌操作原則技藝當(dāng)今不但在分子生物學(xué)科學(xué)研究和運(yùn)用處起著至關(guān)重要的功效，并且在很多微生物技藝中也被廣泛運(yùn)用。比如轉(zhuǎn)基因水稻技藝、單抗技藝等。

清理室沉降菌檢測(cè)限度安全操作規(guī)程

1目地：建立清理室中沉降菌的檢測(cè)限度安全操作規(guī)程，確保藥物在劃分清理等級(jí)內(nèi)舉辦生產(chǎn)制造。

2局限性：清理室的沉降菌的檢測(cè)。

3根據(jù)：我國(guó)限度GB/T 16294-1996。

4崗位職責(zé)：QA潔凈度檢測(cè)員工、微生物菌種磨煉員工對(duì)本規(guī)章制度的實(shí)行用心。

5內(nèi)容
5.1清理室：對(duì)細(xì)顆粒物及微生物菌種環(huán)境污染劃分需舉辦自然環(huán)境操縱的屋子或地區(qū)。

5.2清理事情臺(tái)：一種事情臺(tái)或是與這類一樣一個(gè)封禁施工圍擋事情區(qū)。其特性是本身可以供貨經(jīng)過過慮的氣體或汽體，如豎直層.流清理罩、水準(zhǔn)層流罩、豎直層.流清理事情臺(tái)、水準(zhǔn)層.流清理事情臺(tái)、自凈作用器等。

5.3潔凈度：清理自然環(huán)境內(nèi)模塊容積空氣中含超過或就是某一粒度飄浮顆粒的容許統(tǒng)計(jì)分析數(shù)。

5.4菌體：病菌培育后，由一個(gè)或好多個(gè)病菌滋長(zhǎng)而產(chǎn)生的一病菌集落，通稱CFU。一般 用數(shù)量提示。

5.5測(cè)試方法
5.5.1方法簡(jiǎn)述：本測(cè)試方法履行地基沉降法，即根據(jù)當(dāng)然地基沉降基本原理互聯(lián)網(wǎng)在空氣中的微生物顆粒于培育基平皿，經(jīng)兩天之上培育，在適宜的標(biāo)準(zhǔn)下讓其滋長(zhǎng)到由此可見的菌體數(shù)，來鑒定清理自然環(huán)境內(nèi)的活微生物菌種數(shù)，并為此來鑒定清理室的潔凈度。
5.5.2常用的儀器設(shè)備和武器裝備
5.5.2.1髙壓滅菌鍋：應(yīng)用時(shí)參考文檔GZ-ZL-SOP-066-00舉辦實(shí)際操作。
5.5.2.2控溫培育箱：務(wù)必按時(shí)對(duì)培育箱的溫度表舉辦計(jì)量檢定。
5.5.2.3培育皿：一樣平常接受中90mm×15mm硼氯化鎂夾層玻璃培育皿。應(yīng)用前將培育皿放置121℃濕熱滅菌二十分鐘。
5.5.2.4培育基：簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培育基。將培育基加溫熔融，制冷至約45℃在無菌操作原則條
件下將培育基引入培育皿，每皿約15m1。待瓊脂培育基凝結(jié)后，將培育基平皿放進(jìn)30～35℃控溫培育箱中培育數(shù)鐘頭，若培育基平皿上確實(shí)沒有菌體生長(zhǎng)發(fā)育，就可以供采樣用，制取好的培育基平皿應(yīng)在2～8℃的自然環(huán)境中儲(chǔ)放。
5.5.3測(cè)試流程
5.5.3.1采樣方法：將已制取好的培育皿置放在預(yù)先確定的抽樣點(diǎn)，開啟培育皿蓋，使培育基外邊外露0.5鐘頭，再將培育皿蓋上蓋后顛倒。
5.5.3.2培育：全部采樣竣事，將培育皿倒放置控溫培育箱中培育。在30～35℃培育，時(shí)間不少于兩天。每次培育基應(yīng)該有對(duì)比實(shí)驗(yàn)，查驗(yàn)培育基自身是不是環(huán)境污染，可每次選中3只培育皿作對(duì)比培育。
5.5.3.3菌落計(jì)數(shù)：用人眼立即記數(shù)，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗(yàn)，有無忽略。若培育皿上面有兩個(gè)或兩個(gè)之上菌體重合，可辨別時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)之上的菌落計(jì)數(shù)。

5.6重視事宜
4.6.1測(cè)試用品要做殺菌處理，以保證 測(cè)試的穩(wěn)定性、精確性。
5.6.2接受一切對(duì)策避免人為因素對(duì)樣版的環(huán)境污染。
5.6.3對(duì)培育基、培育標(biāo)準(zhǔn)以及他主要參數(shù)作詳盡的記錄。
5.6.4因?yàn)榧?xì)菌種類多種多樣，差別甚大，記數(shù)時(shí)一樣平常用散射光于培育皿之后或正臉細(xì)心調(diào)查，不必漏計(jì)培育皿邊沿生長(zhǎng)發(fā)育的菌體，并須重視細(xì)菌菌落與培育基沉淀的差別，必須時(shí)要光學(xué)顯微鏡辨別。
5.6.5采樣前要認(rèn)真仔細(xì)每一個(gè)培育皿的品質(zhì)，如發(fā)覺霉變、損壞或環(huán)境污染的應(yīng)去除。

5.7測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)
5.7.1測(cè)試情況
5.7.1.1沉降菌測(cè)試前：被測(cè)試清理室（區(qū)）的溫度濕度須抵達(dá)劃分的規(guī)定，負(fù)壓差、務(wù)必操縱在劃分值內(nèi)。被測(cè)試清理室（區(qū)）已消毒。
5.7.1.2測(cè)試情況有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動(dòng)態(tài)性二種，并在敘述中標(biāo)明測(cè)試情況。
5.7.1.3測(cè)試員工：測(cè)試員工務(wù)必衣著相符合自然環(huán)境潔凈度級(jí)其他事情服。靜態(tài)數(shù)據(jù)測(cè)試時(shí)，房間內(nèi)測(cè)試員工不可超過2自我個(gè)人。
5.7.2測(cè)試時(shí)間
5.7.2.1對(duì)單邊流，如100級(jí)凈化處理屋子里及層.流事情臺(tái)，測(cè)試應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于十分鐘后最開始。
5.7.2.2對(duì)非單邊流，如10000級(jí)、100000級(jí)之上的凈化處理屋子，測(cè)試應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于三十分鐘最開始。

5.8沉降菌記數(shù)
5.8.1至少采樣點(diǎn)數(shù)量：可按表1明確。在滿足至少測(cè)等級(jí)的另外，還宜滿足至少培育皿數(shù)，見表2。
表1至少采樣點(diǎn)數(shù)量
總面積(m2)           潔凈度等級(jí)
            100  10000  100000  300000
＜10        2～3  2      2     2
≥10～＜20  4     2      2     2
≥20～＜40  8     2      2     2
≥40～＜100  16    4      2     2
≥100～＜200  40   10     3     3
注：表格中的總面積針對(duì)單邊流清理室就是指排風(fēng)總面積，針對(duì)非單邊流清理室就是指屋子總面積。
表2至少培育皿數(shù)
潔凈度等級(jí) 所需Φ90mm培育皿數(shù)（以地基沉降0.5鐘頭計(jì)）
  100             14
  10000            2
  100000           2
  300000           2
5.8.2采樣點(diǎn)的布署：事情區(qū)測(cè)試點(diǎn)部位距地0.8～1.5m上下（稍高于事人情世故）?？稍谥匾淦餮b備或重要事情流動(dòng)性局限性處增加測(cè)量點(diǎn)，采樣點(diǎn)的布署應(yīng)爭(zhēng)取均值，阻攔采樣點(diǎn)在某 部分地區(qū)過度集中化，某部分地區(qū)過度希奇。
5.8.3記錄：測(cè)試敘述中應(yīng)記錄屋子溫度、空氣濕度、壓力差、測(cè)試情況及測(cè)試數(shù)據(jù)信息。
5.8.4實(shí)際效果籌算：用記數(shù)方法得到每個(gè)培育皿的菌體數(shù)。均值菌體數(shù)的籌算見上式：
m1 m2 …… mn
均值菌體數(shù)m=n
式中：m為均值菌體數(shù)；m1為2號(hào)培育皿菌體數(shù)；m2為2號(hào)培育皿菌體數(shù)；mn為n號(hào)培育皿菌體數(shù)；n為培育皿數(shù)量。
5.8.5實(shí)際效果鑒定：用均值菌體數(shù)分辨清理室的空氣中的微生物菌種。
5.8.6清理室（區(qū)）內(nèi)的均值菌體數(shù)務(wù)必小于所選中的鑒定限度（見表3）。
5.8.7若某清理室（區(qū)）的均值菌體數(shù)超越鑒定限度，則務(wù)必對(duì)于此事地區(qū)優(yōu)先消毒殺菌，隨后再次測(cè)試2次，測(cè)試實(shí)際效果務(wù)必合格。
表3 
清理等級(jí)     100級(jí)   10000級(jí)   100000級(jí)   300000級(jí)
限度（均值）  一個(gè)/皿  3個(gè)/皿    10個(gè)/皿    15個(gè)/皿

關(guān)鍵論文參考文獻(xiàn)：我國(guó)限度GB/T 16294-1996