,
,⒈ 目地： 創(chuàng)建浮游菌檢測(cè)的規(guī)范操作程序，用以標(biāo)準(zhǔn)職工的檢測(cè)實(shí)際操作。,⒉ 范疇：適用企業(yè)內(nèi)部生產(chǎn)制造清潔區(qū)域內(nèi)的浮游菌檢測(cè)工作中,⒊ 義務(wù)：生產(chǎn)技術(shù)部、生產(chǎn)線、品質(zhì)服務(wù)部、QC檢測(cè)室主任、檢查員對(duì)本規(guī)程的實(shí)行承擔(dān)。,⒋ 檢測(cè)根據(jù)：GB/T16293―1996（醫(yī)藥工業(yè)凈化室浮游菌的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)）。,
, ⒌ 內(nèi)容：,
,5.1 器材與原材料,
,5.1.1 浮游菌采樣器,5.1.2 真空泵手壓泵,5.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)皿,5.1.4 一般骨頭湯培養(yǎng)液,5.1.5 恒溫培養(yǎng)箱,
,5.2 測(cè)試流程,5.2.1 檢測(cè)前，儀器設(shè)備、細(xì)胞培養(yǎng)皿表層務(wù)必嚴(yán)苛消毒殺菌。,5.2.1.1 采試品在進(jìn)到被測(cè)前首先用消毒房間的消毒液殺菌，用以100級(jí)凈化室的采樣器宜一直放到被 測(cè)屋子里。,5.2.1.2 用消毒液擦干凈細(xì)胞培養(yǎng)皿的外表層。,5.2.1.3 取樣前，先用消毒液消毒殺菌采樣器的機(jī)蓋、輪盤及其外罩的內(nèi)外邊，取樣完畢，于用消毒液輕輕地噴涌外罩的內(nèi)腔和輪盤。,5.2.1.4 取樣口及取樣管，應(yīng)用前務(wù)必高溫滅菌。如用消毒液對(duì)取樣管的及表面及內(nèi)腔開展消毒殺菌時(shí)，應(yīng)將管內(nèi)的殘余液扔掉并晾曬。,5.2.1.5 取樣者應(yīng)配戴與被測(cè)清潔地區(qū)相對(duì)應(yīng)的工作服裝，在輪盤上放進(jìn)或替換細(xì)胞培養(yǎng)皿前，兩手用消毒液消毒殺菌。,5.2.2 取樣程序流程,5.2.2.1 儀器設(shè)備經(jīng)消毒殺菌后先不放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)皿，啟動(dòng)機(jī)械泵抽真空，使儀器設(shè)備中的殘留消毒液揮發(fā)，時(shí)間不少于五分鐘，并調(diào)準(zhǔn)總流量、輪盤轉(zhuǎn)速比。,5.2.2.2 關(guān)掉機(jī)械泵，放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)皿，蓋上外蓋后調(diào)整采樣器間隙高寬比。,5.2.2.3 置取樣口于取樣點(diǎn)后，先后打開采樣器、機(jī)械泵、旋轉(zhuǎn)計(jì)時(shí)器，依據(jù)取樣量設(shè)置取樣時(shí)間。,5.2.3 塑造,所有取樣完畢后，將細(xì)胞培養(yǎng)皿倒放置恒溫培養(yǎng)箱中塑造。,在30～35℃恒溫箱中塑造，時(shí)間不少于兩天。,每次培養(yǎng)液應(yīng)該有對(duì)比實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)培養(yǎng)液自身是不是環(huán)境污染?？擅看芜x中3只細(xì)胞培養(yǎng)皿作對(duì)比塑造。,5.2.4 菌落計(jì)數(shù),5.2.4.1 用人眼立即記數(shù)、標(biāo)識(shí)或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗(yàn)，看是不是有忽略。,5.2.4.2 若平板電腦上面有兩個(gè)或兩個(gè)之上的菌體重合，可辨別時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)之上菌落計(jì)數(shù)。,
,5.3 常見(jiàn)問(wèn)題,5.3.1 采樣器的取樣口務(wù)必用以便消毒殺菌及有機(jī)化學(xué)特性平穩(wěn)的原材料生產(chǎn)制造。,5.3.2 取樣管禁止漏水，內(nèi)腔應(yīng)光潔。,5.3.3 取樣管的長(zhǎng)短應(yīng)依據(jù)測(cè)量點(diǎn)的高寬比定，盡量避免彎折。,5.3.4 應(yīng)用前要認(rèn)真仔細(xì)每一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)皿的品質(zhì)，培養(yǎng)液及細(xì)胞培養(yǎng)皿有霉變、損壞或環(huán)境污染的不可以應(yīng)用。,5.3.5 實(shí)際操作時(shí)要避免取樣管的環(huán)境污染和別人為對(duì)樣版的環(huán)境污染。,5.3.6 對(duì)培養(yǎng)液、塑造標(biāo)準(zhǔn)以及他主要參數(shù)作詳盡的紀(jì)錄。,5.3.7 因?yàn)椴【鞣N多種多樣，區(qū)別甚大，記數(shù)時(shí)一般用散射光于細(xì)胞培養(yǎng)皿反面或下邊認(rèn)真觀察，不必漏計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)皿邊沿生長(zhǎng)發(fā)育的菌體，并須留意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)液沉淀的差別，必需時(shí)要光學(xué)顯微鏡辨別。,
,5.4 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),5.4.1 測(cè)試狀態(tài),5.4.1.1  浮游菌檢測(cè)前，被檢測(cè)凈化室 （區(qū)）溫、環(huán)境濕度須做到要求的規(guī)定，負(fù)壓差、 換風(fēng)、氣體壓力務(wù)必操縱在標(biāo)準(zhǔn)值內(nèi)。,5.4.1.2 浮游菌檢測(cè)前，被 檢測(cè)凈化室（區(qū)）早已過(guò)消毒殺菌。,5.4.1.3 測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動(dòng)態(tài)性 二種，測(cè)試狀態(tài)的挑選務(wù)必合乎生產(chǎn)制造的規(guī)定，并在匯報(bào)中標(biāo)明測(cè)試狀態(tài)。,5.4.2 測(cè)試工程師,5.4.2.1 測(cè)試工程師務(wù)必配戴合乎自然環(huán)境等級(jí)的工作服裝。,5.4.2.2 靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測(cè)時(shí)，房間內(nèi)測(cè)試工程師不可超過(guò)兩人。,5.4.3 檢測(cè)時(shí)間,5.4.3.1 對(duì)單邊流，如100級(jí)凈化處理屋子及層.流操作臺(tái)，檢測(cè)應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于十分鐘后逐漸。,5.4.3.2 對(duì)非單邊流，如10000級(jí)，以及之上的凈化處理屋子，檢測(cè)應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于三十分鐘后逐漸。,5.4.4 浮游菌濃度計(jì)算,5.4.4.1 取樣點(diǎn)總數(shù)以及布局,5.4.4.1.1 至少取樣點(diǎn)數(shù)量：浮游菌檢測(cè)的至少取樣點(diǎn)數(shù)量分成日常檢測(cè)及自然環(huán)境認(rèn)證二種狀況，詳細(xì)情況見(jiàn)下表。,
, 至少取樣點(diǎn)數(shù)量,5.4.4.1.2  取樣點(diǎn)的部位,5.4.4.1.2.1 對(duì)每一個(gè)100級(jí)清潔實(shí)際操作地區(qū)（如層流罩、層.流操作臺(tái)），可在離藥品敞開式出口處三十厘米處設(shè)測(cè)量點(diǎn)。,5.4.4.1.2.2 對(duì)每一個(gè)10000級(jí)清潔工作中地區(qū)（如藥品張口工作區(qū)域）可在工作臺(tái)面處設(shè)測(cè)量點(diǎn)。,5.4.4.1.2.3  正壓送風(fēng)口測(cè)量點(diǎn)部位離去排風(fēng)面三十厘米上下。,5.4.4.1.2.4 可在主要設(shè)備或重要工作中主題活動(dòng)范疇處提升測(cè)量點(diǎn)。,5.4.4.2 最少取樣量,取樣量依據(jù)日常檢測(cè)及自然環(huán)境認(rèn)證定，每一次最少取樣量見(jiàn)下表。, 最少取樣量,5.4.4.3 取樣頻次：每一個(gè)取樣點(diǎn)一般取樣一次。,5.4.5 取樣常見(jiàn)問(wèn)題,5.4.5.1 針對(duì)單邊流功正壓送風(fēng)口，采樣器取樣支管房屋朝向應(yīng)正對(duì)著氣旋方位；針對(duì)非單邊流，取樣支管往上。,5.4.5.2 布局取樣點(diǎn)時(shí)，最少應(yīng)離去細(xì)顆粒物較集中化的送風(fēng)口1米之上。,5.4.5.3 取樣時(shí)，測(cè)試工程師應(yīng)立在取樣口的低處側(cè)。,
,5.5  紀(jì)錄：對(duì)檢測(cè)狀況開展紀(jì)錄（屋子溫度、空氣濕度、壓力差及測(cè)試狀態(tài)等）。,
,5.6  結(jié)果測(cè)算,用記數(shù)方式 得到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。,每一個(gè)測(cè)量點(diǎn)的浮游菌均值濃度值的測(cè)算見(jiàn)上式。,                        菌體數(shù),均值濃度值（個(gè)ㄍm3）= ―――――,                        取樣量,
,

凈化室浮游菌檢測(cè)規(guī)范安全操作規(guī)程

文件夾名稱：凈化室浮游菌檢測(cè)規(guī)范安全操作規(guī)程							文件編號(hào)：ZL/SOP/ZK/02300
制訂人：				日期：     年  月  日			文件屬性：工作要求
審批人：				日期：     年  月  日			版   次：第一版
準(zhǔn)許人：				日期：     年  月  日			印   數(shù)：共5份
起效日期：                          年  月  日							授予單位：綜合辦公室
派發(fā)至： 品質(zhì)總經(jīng)理、品質(zhì)服務(wù)部、QC檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、綜合辦公室
變動(dòng)記述	修定號(hào)	修定人	準(zhǔn)許日期		起效日期	原 因 及 目 的

⒈ 目地：創(chuàng)建浮游菌檢測(cè)的規(guī)范操作程序，用以標(biāo)準(zhǔn)職工的檢測(cè)實(shí)際操作。

⒉ 范疇：適用企業(yè)內(nèi)部生產(chǎn)制造清潔區(qū)域內(nèi)的浮游菌檢測(cè)工作中

⒊ 義務(wù)：生產(chǎn)技術(shù)部、生產(chǎn)線、品質(zhì)服務(wù)部、QC檢測(cè)室主任、檢查員對(duì)本規(guī)程的實(shí)行承擔(dān)。

⒋ 檢測(cè)根據(jù)：GB/T16293―1996（醫(yī)藥工業(yè)凈化室浮游菌的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)）。

⒌ 內(nèi)容：

5.1 器材與原材料

5.1.1 浮游菌采樣器

5.1.2 真空泵手壓泵

5.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)皿

5.1.4 一般骨頭湯培養(yǎng)液

5.1.5 恒溫培養(yǎng)箱

5.2 測(cè)試流程

5.2.1 檢測(cè)前，儀器設(shè)備、細(xì)胞培養(yǎng)皿表層務(wù)必嚴(yán)苛消毒殺菌。

5.2.1.1 采試品在進(jìn)到被測(cè)前首先用消毒房間的消毒液殺菌，用以100級(jí)凈化室的采樣器宜一直放到被 測(cè)屋子里。

5.2.1.2 用消毒液擦干凈細(xì)胞培養(yǎng)皿的外表層。

5.2.1.3 取樣前，先用消毒液消毒殺菌采樣器的機(jī)蓋、輪盤及其外罩的內(nèi)外邊，取樣完畢，于用消毒液輕輕地噴涌外罩的內(nèi)腔和輪盤。

5.2.1.4 取樣口及取樣管，應(yīng)用前務(wù)必高溫滅菌。如用消毒液對(duì)取樣管的及表面及內(nèi)腔開展消毒殺菌時(shí)，應(yīng)將管內(nèi)的殘余液扔掉并晾曬。

5.2.1.5 取樣者應(yīng)配戴與被測(cè)清潔地區(qū)相對(duì)應(yīng)的工作服裝，在輪盤上放進(jìn)或替換細(xì)胞培養(yǎng)皿前，兩手用消毒液消毒殺菌。

5.2.2 取樣程序流程

5.2.2.1 儀器設(shè)備經(jīng)消毒殺菌后先不放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)皿，啟動(dòng)機(jī)械泵抽真空，使儀器設(shè)備中的殘留消毒液揮發(fā)，時(shí)間不少于五分鐘，并調(diào)準(zhǔn)總流量、輪盤轉(zhuǎn)速比。

5.2.2.2 關(guān)掉機(jī)械泵，放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)皿，蓋上外蓋后調(diào)整采樣器間隙高寬比。

5.2.2.3 置取樣口于取樣點(diǎn)后，先后打開采樣器、機(jī)械泵、旋轉(zhuǎn)計(jì)時(shí)器，依據(jù)取樣量設(shè)置取樣時(shí)間。

5.2.3 塑造

所有取樣完畢后，將細(xì)胞培養(yǎng)皿倒放置恒溫培養(yǎng)箱中塑造。

在30～35℃恒溫箱中塑造，時(shí)間不少于兩天。

每次培養(yǎng)液應(yīng)該有對(duì)比實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)培養(yǎng)液自身是不是環(huán)境污染?？擅看芜x中3只細(xì)胞培養(yǎng)皿作對(duì)比塑造。

5.2.4 菌落計(jì)數(shù)

5.2.4.1 用人眼立即記數(shù)、標(biāo)識(shí)或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗(yàn)，看是不是有忽略。

5.2.4.2 若平板電腦上面有兩個(gè)或兩個(gè)之上的菌體重合，可辨別時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)之上菌落計(jì)數(shù)。

5.3 常見(jiàn)問(wèn)題

5.3.1 采樣器的取樣口務(wù)必用以便消毒殺菌及有機(jī)化學(xué)特性平穩(wěn)的原材料生產(chǎn)制造。

5.3.2 取樣管禁止漏水，內(nèi)腔應(yīng)光潔。

5.3.3 取樣管的長(zhǎng)短應(yīng)依據(jù)測(cè)量點(diǎn)的高寬比定，盡量避免彎折。

5.3.4 應(yīng)用前要認(rèn)真仔細(xì)每一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)皿的品質(zhì)，培養(yǎng)液及細(xì)胞培養(yǎng)皿有霉變、損壞或環(huán)境污染的不可以應(yīng)用。

5.3.5 實(shí)際操作時(shí)要避免取樣管的環(huán)境污染和別人為對(duì)樣版的環(huán)境污染。

5.3.6 對(duì)培養(yǎng)液、塑造標(biāo)準(zhǔn)以及他主要參數(shù)作詳盡的紀(jì)錄。

5.3.7 因?yàn)椴【鞣N多種多樣，區(qū)別甚大，記數(shù)時(shí)一般用散射光于細(xì)胞培養(yǎng)皿反面或下邊認(rèn)真觀察，不必漏計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)皿邊沿生長(zhǎng)發(fā)育的菌體，并須留意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)液沉淀的差別，必需時(shí)要光學(xué)顯微鏡辨別。

5.4 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

5.4.1 測(cè)試狀態(tài)

5.4.1.1  浮游菌檢測(cè)前，被檢測(cè)凈化室 （區(qū)）溫、環(huán)境濕度須做到要求的規(guī)定，負(fù)壓差、換風(fēng)、氣體壓力務(wù)必操縱在標(biāo)準(zhǔn)值內(nèi)。

5.4.1.2 浮游菌檢測(cè)前，被 檢測(cè)凈化室（區(qū)）早已過(guò)消毒殺菌。

5.4.1.3 測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)數(shù)據(jù)和動(dòng)態(tài)性 二種，測(cè)試狀態(tài)的挑選務(wù)必合乎生產(chǎn)制造的規(guī)定，并在匯報(bào)中標(biāo)明測(cè)試狀態(tài)。

5.4.2 測(cè)試工程師

5.4.2.1 測(cè)試工程師務(wù)必配戴合乎自然環(huán)境等級(jí)的工作服裝。

5.4.2.2 靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測(cè)時(shí)，房間內(nèi)測(cè)試工程師不可超過(guò)兩人。

5.4.3 檢測(cè)時(shí)間

5.4.3.1 對(duì)單邊流，如100級(jí)凈化處理屋子及層.流操作臺(tái)，檢測(cè)應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于十分鐘后逐漸。

5.4.3.2 對(duì)非單邊流，如10000級(jí)，以及之上的凈化處理屋子，檢測(cè)應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件一切正常運(yùn)作不少于三十分鐘后逐漸。

5.4.4 浮游菌濃度計(jì)算

5.4.4.1 取樣點(diǎn)總數(shù)以及布局

5.4.4.1.1 至少取樣點(diǎn)數(shù)量：浮游菌檢測(cè)的至少取樣點(diǎn)數(shù)量分成日常檢測(cè)及自然環(huán)境認(rèn)證二種狀況，詳細(xì)情況見(jiàn)下表。

至少取樣點(diǎn)數(shù)量

總面積	清潔等級(jí)
	100		10000		100000
	認(rèn)證	檢測(cè)	認(rèn)證	檢測(cè)	認(rèn)證	檢測(cè)
<10	2～3	1	2	1	2	――
≥10＜20	4	2	2	1	2	――
≥20＜40	8	3	2	1	2	――
≥40＜100	16	4	4	1	2	――
≥100＜200	40	――	10	――	3	――
≥200＜400	80	――	20	――	6	――
400	160	――	40	――	13	――
注：（1）表格中的總面積，針對(duì)100級(jí)的單邊流凈化室（包含層.流操作臺(tái)），指的是正壓送風(fēng)口表面積；針對(duì)10000級(jí)、100000非單向流潔凈室，指的是屋子總面積。   （2）日常檢測(cè)的取樣點(diǎn)數(shù)量由生產(chǎn)工藝流程的重要實(shí)際操作點(diǎn)來(lái)明確。

5.4.4.1.2  取樣點(diǎn)的部位

5.4.4.1.2.1 對(duì)每一個(gè)100級(jí)清潔實(shí)際操作地區(qū)（如層流罩、層.流操作臺(tái)），可在離藥品敞開式出口處三十厘米處設(shè)測(cè)量點(diǎn)。

5.4.4.1.2.2 對(duì)每一個(gè)10000級(jí)清潔工作中地區(qū)（如藥品張口工作區(qū)域）可在工作臺(tái)面處設(shè)測(cè)量點(diǎn)。

5.4.4.1.2.3  正壓送風(fēng)口測(cè)量點(diǎn)部位離去排風(fēng)面三十厘米上下。

5.4.4.1.2.4 可在主要設(shè)備或重要工作中主題活動(dòng)范疇處提升測(cè)量點(diǎn)。

5.4.4.2 最少取樣量

取樣量依據(jù)日常檢驗(yàn)及自然環(huán)境認(rèn)證定，每一次最少取樣量見(jiàn)下表。

最少取樣量

潔凈度等級(jí)等級(jí)	取樣量，Lㄍ次
	日常檢測(cè)	自然環(huán)境認(rèn)證
100級(jí)	600	1000
10000級(jí)	400	500
100000級(jí)	50	100

5.4.4.3 取樣頻次：每一個(gè)取樣點(diǎn)一般取樣一次。

5.4.5 取樣常見(jiàn)問(wèn)題

5.4.5.1 針對(duì)單向流功正壓送風(fēng)口，采樣器取樣支管房屋朝向應(yīng)正對(duì)著氣旋方位；針對(duì)非單向流，取樣支管往上。

5.4.5.2 布局取樣點(diǎn)時(shí)，最少應(yīng)離去細(xì)顆粒物較集中化的送風(fēng)口1米之上。

5.4.5.3 取樣時(shí)，測(cè)試工程師應(yīng)立在取樣口的低處側(cè)。

5.5  紀(jì)錄：對(duì)檢測(cè)狀況開展紀(jì)錄（屋子溫度、空氣濕度、壓力差及測(cè)試狀態(tài)等）。

5.6  結(jié)果測(cè)算

用記數(shù)方式 得到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。

每一個(gè)測(cè)量點(diǎn)的落菌均值濃度值的測(cè)算見(jiàn)上式。

                        菌體數(shù)

均值濃度值（個(gè)ㄍm3）= ―――――

                        取樣量